Caracterização funcional de compostos que interferem com o desenvolvimento intracelular de Trypanosoma cruzi

• Processo: 15/06489-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2018
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Lucio Holanda Gondim de Freitas Junior
• Beneficiário: Adalberto Miguel de Araújo Júnior
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Trypanosoma cruzi Doença de Chagas Descoberta de drogas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Desenvolvimento intracelular | Doença de Chagas | Ensaio Fenotípico | Hit fenotípico | Trypanosoma cruzi | Drug Discovery

Resumo

Desde que a Tripanossomíase americana foi descoberta, vários estudos têm sido feitos para se saber mais sobre a patogênese da Doença de Chagas. Embora tenha havido progresso em pesquisas relacionadas com tal enfermidade, a biologia do Trypanosoma cruzi permanece ainda pouco compreendida em comparação com outros tripanosomatídeos. Ademais, proteínas envolvidas na diferenciação desse parasita permanecem pouco caracterizadas, e pouco se sabe sobre os fatores ambientais e da célula hospedeira que podem desencadear esse processo. Triagens fenotípicas baseadas em células têm sido utilizadas com sucesso para a descoberta de alvos terapêuticos e validação em alguns protozoários parasitas quando ferramentas de depleção gênica como RNAi não estão disponíveis. No caso de T. cruzi, tal abordagem mostra-se interessante para investigação de sua biologia. O presente projeto pretende desenvolver um ensaio de triagem de alto conteúdo (high content screening) para permitir a descoberta de compostos capazes de modular a infecção intracelular por T. cruzi gerando, dessa maneira, sondas químicas que irão auxiliar na descoberta de moléculas que estejam por trás dos processos de diferenciação do parasita. Possivelmente, tais sondas implicarão a geração de novos candidatos para quimioterapia antichagásica. Em ensaios preliminares, focamos nossas pesquisas em quinases como alvo potencial para o T. cruzi, devido à sua participação na morfologia, proliferação, diferenciação e viabilidade geral do parasita. Uma triagem de alto conteúdo contra T. cruzi usando uma biblioteca específica de 4000 compostos anti-quinase/fosfatase foi executada e compostos capazes de interferir com o desenvolvimento intracelular do parasita foram identificados. Portanto, tentaremos validar esses hits fenotípicos, otimizar o protocolo de triagem de alto conteúdo, elucidar por diferentes técnicas os alvos envolvidos na ação de tais hits e realizar uma segunda triagem primária objetivando identificar compostos que sejam efetivos contra o estágio crônico da doença. (AU)