Efeito da atividade simbiótica sob a integridade do epitélio intestinal em microbiota obesa e eutrófica

• Processo: 16/20336-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2018
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia
• Pesquisador responsável: Katia Sivieri
• Beneficiário: Fernanda Bianchi
• Supervisor: Lene Jespersen
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Copenhagen, Frederiksberg, Dinamarca
• Vinculado à bolsa: 15/08228-6 - Seleção e avaliação da combinação entre resíduos de frutas tropicais e cepas probióticas na modulação da microbiota intestinal de indivíduos obesos em relação à de eutróficos utilizando simulador do ecossistema microbiano humano., BP.DR
• Assunto(s): Microbioma gastrointestinal Mucosa intestinal Citotoxicidade Reação em cadeia da polimerase em tempo real
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Barreira intestinal | Citotoxidade | microbiota intestinal | qPCR | Resistência elétrica transepitelial | sequenciamento | microbiota intestinal

Resumo

O epitélio intestinal humano é uma barreira que separa o conteúdo celular interno do externo, prevenindo a entrada de substâncias prejudiciais. Estudos têm demonstrado que o aumento da permeabilidade intestinal está associada à várias doenças, tais como a obesidade. A microbiota intestinal é alvo de várias vias de sinalização intracelular e pode regular a função da barreira intestinal da mesma forma como algumas fibras prebióticos e cepas probióticas, as quais têm a capacidade melhorar a função da barreira intestinal e, em alguns casos, prevenir ou inverter os efeitos adversos de agentes patógenos. O objetivo deste trabalho será avaliar o efeito da combinação entre uma cepa probiótica e um subproduto de fruta tropical na integridade da barreira intestinal por meio de resistência elétrica transepitelial, expressão das proteínas da "tight junction" e analisar a citotoxicidade das células Caco- 2 durante tratamento em um Simulador do Ecossistema Microbiano Humano (SEMH®) utilizando fezes de voluntários obesos e eutróficos. Serão coletadas amostras de cada região que simula o cólon (cólon ascendente, transverso e descendente) do SEMH ®, durante os períodos de controle, de tratamento com a combinação e de pós-tratamento utilizando microbiota obesa e eutrófica. Será determinada a resistência elétrica transepitelial, por meio de monocamadas polarizadas de células epiteliais do intestino humano (Caco-2), durante todos os períodos de experimentos no SEMH® (controle, tratamento e pós-tratamento) utilizando as duas microbiotas. Será realizada a expressão de RNAm das "tigh junction" por qPCR (Fluidigm sistema qPCR) das amostras das regiões do cólon que apresentarem mudanças na TEER. A citotoxicidade das células Caco-2 será realizada por MTT (brometo de 3- [4,5-dimetiltiazol-2-il] -2,5-difeniltetrazólio) utilizando amostras do SEMH ®. O sequenciamento do gene rRNA 16S das amostras do SEMH® será realizado utilizando a plataforma Illumina MiSeq®. Será utilizado o programa SPSS para a análise estatística dos resultados do ensaio de MTT, das medições TEER e da expressão do mRNA. Os dados serão avaliados por meio de análise de variância seguida pelo teste de Tukey caso os dados apresentarem distribuição normal e, teste não paramétrico Kruskal-Walls com correções de Bonferroni se os dados não apresentarem distribuição normal. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SRIMAHAEAK, THANYAPORN; BIANCHI, FERNANDA; CHLUMSKY, ONDREJ; LARSEN, NADJA; JESPERSEN, LENE. In-vitro study of Limosilactobacillus fermentum PCC adhesion to and integrity of the Caco-2 cell monolayers as affected by pectins. Journal of Functional Foods, v. 79, APR 2021. (16/20336-1)

BIANCHI, FERNANDA; LARSEN, NADJA; TIEGHI, THATIANA DE MELLO; ADORNO, MARIA ANGELA T.; SAAD, I, SUSANA M.; JESPERSEN, LENE; SIVIERI, KATIA. In vitro modulation of human gut microbiota composition and metabolites by Bifidobacterium longum BB-46 and a citric pectin. Food Research International, v. 120, p. 595-602, JUN 2019. (15/13965-0, 15/08228-6, 13/50506-8, 16/20336-1)

BIANCHI, FERNANDA; LARSEN, NADJA; TIEGHI, THATIANA DE MELLO; TALLARICO ADORNO, MARIA ANGELA; KOT, WITOLD; ISAY SAAD, SUSANA MARTA; JESPERSEN, LENE; SIVIERI, KATIA. Modulation of gut microbiota from obese individuals by in vitro fermentation of citrus pectin in combination with Bifidobacterium longum BB-46. Applied Microbiology and Biotechnology, v. 102, n. 20, p. 8827-8840, OCT 2018. (15/13965-0, 16/20336-1, 13/50506-8, 15/08228-6)

BIANCHI, FERNANDA; LARSEN, NADJA; TIEGHI, THATIANA DE MELLO; ADORNO, MARIA ANGELA T.; SAAD, SUSANA M., I; JESPERSEN, LENE; SIVIERI, KATIA. In vitro modulation of human gut microbiota composition and metabolites by Bifidobacterium longum BB-46 and a citric pectin. Food Research International, v. 120, p. 8-pg., 2019-06-01. (16/20336-1, 13/50506-8, 15/13965-0, 15/08228-6)