Expressão gênica condicional em P. falciparum

• Processo: 17/05622-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Mauro Ferreira de Azevedo
• Beneficiário: Caroline Lima dos Santos
• Instituição Sede: Instituto de Saúde e Sociedade (ISS). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus Baixada Santista. Santos , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 15/19316-3 - Mecanismos de egresso em P. falciparum: identificação de novos alvos terapêuticos, AP.JP
• Assunto(s): Plasmodium falciparum Malária Luciferases Genética reversa Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: expressão gênica | luciferase | malária | Plasmodium | Genética Reversa

Resumo

A possibilidade de modificar loci gnômicos para que os genes de interesse sejam expressos de forma condicional, além da expressão exógena de transgenes de forma regulada, tem permitido o estudo da função de genes que são essenciais a P. falciparum durante o ciclo eritrocítico. No entanto, esta tecnologia ainda apresenta algumas limitações, sendo uma das principais a baixa regulação da expressão genica. Este "vazamento" de expressão em condições onde o gene deveria estar silenciado permite que seu produto mantenha a atividade, inviabilizando estudos que se baseiem na análise do fenótipo resultante da perda de função. A combinação de diferentes sistemas, baseados na regulação da estabilidade da proteína ou do transcrito, pode permitir um silenciamento mais eficaz da expressão do gene de interesse e viabilizar estudos funcionais. Este projeto terá por objetivo testar esta hipótese, determinando se a combinação de sistemas permite uma melhor regulação. A estratégia se baseará na modificação de plasmídeos repórteres, transfecção transiente em P. falciparum, cultivo na presença dos ligantes específicos e quantificação da expressão do gene repórter através da atividade da Nanoluciferase (Nluc). (AU)