| Processo: | 18/03351-2 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de janeiro de 2019 |
| Data de Término da vigência: | 30 de abril de 2022 |
| Área de conhecimento: | Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos |
| Pesquisador responsável: | José Freire da Silva Neto |
| Beneficiário: | Kelly Cristina Martins Barroso |
| Instituição Sede: | Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Sistemas de secreção tipo II Chromobacterium violaceum Virulência |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Chromobacterium violaceum | enzimas degradativas | patógeno humano | sistema de secreção do tipo II (T2SS) | sistemas de secreção de proteínas | toxinas secretadas | virulencia bacteriana | Secreção de proteínas em bactérias |
Resumo Os sistemas de secreção são nanomáquinas especializadas em exportar proteínas através do envelope celular bacteriano. O sistema de secreção do tipo II (T2SS) é utilizado por muitas bactérias Gram-negativas para translocar proteínas enoveladas do periplasma para o meio extracelular, incluindo diversas toxinas e enzimas degradativas. A Chromobacterium violaceum, um patógeno oportunista de humanos comumente encontrada no ambiente, possui um operon de 12 genes que codificam um potencial T2SS. Embora seja conhecido que C. violaceum secreta exoproteínas, ainda não se conhece o mecanismo de secreção. Neste trabalho, pretendemos caracterizar o T2SS de C. violaceum, com foco na descoberta de seus substratos e de como ele é regulado. Para isto, serão construídas linhagens mutantes com deleção de genes individuais ou do operon inteiro do T2SS. Estes mutantes serão caracterizados por ensaios de formação de biofilme e atividade de quitinase, protease, lecitinase, lipase e hemolisina. O envolvimento do T2SS em virulência será analisado em modelo de infecção em camundongos. A identificação das proteínas secretadas pelo T2SS será feita através de análise proteômica, comparando os secretomas das linhagens selvagem e mutantes do T2SS. A regulação do T2SS será investigada analisando a expressão do promotor do operon do T2SS em sistema repórter luciferase. Os resultados deste projeto deverão relevar o papel do T2SS para adaptação e sobrevivência de C. violaceum no ambiente e no hospedeiro. (AU) | |
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