Investigação dos possíveis mecanismos de maturação de hepatócitos in vitro induzida por etoposídeo

• Processo: 19/19380-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Mayana Zatz
• Beneficiário: Kayque Alves Telles Silva
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 22/08157-5 - Investigação dos possíveis mecanismos de maturação de hepatócitos in vitro induzida por etoposídeo, BE.EP.DD
• Assunto(s): Engenharia tecidual Hepatócitos Maturação in vitro Etoposídeo Células-tronco pluripotentes induzidas Citometria de fluxo Imunofluorescência Reação em cadeia da polimerase em tempo real Análise de sequência de RNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biologia celular | Células tronco | Engenharia tecidual | fígado | hepatócitos | Engenharia Tecidual

Resumo

O fígado é um órgão fundamental para a regulação metabólica, imune e homeostática do organismo. Hepatopatias crônicas e agudas, congênitas ou decorrentes de hábitos comportamentais, são responsáveis por aproximadamente 2 milhões de mortes por ano. A única opção terapêutica para a remediação de doenças hepáticas severas é a realização de transplantes parcial ou total do fígado. A engenharia tecidual hepática, aliada à tecnologia de células tronco pluripotentes induzidas (hiPSCs), constitui uma alternativa para os procedimentos terapêuticos tradicionais. Protocolos de diferenciação hepática, no entanto, resultam em hepatócitos com fenótipo fetal, dificultando a compreensão de mecanismos celulares de fígados adultos e abordagens de medicina regenerativa. Em experimentos prévios, a aplicação de etoposídeo (VP-16), composto sintético utilizado para indução de apoptose, em cultura celular de hepatócitos derivados de células hiPSCs contribuiu para a indução de maturação celular. O presente projeto tem como objetivo a investigação dos possíveis mecanismos envolvidos na maturação de hepatócitos diferenciados in vitro após tratamento com etoposídeo. hiPSCs já reprogramadas a partir de fibroblastos e eritroblastos de pacientes saudáveis serão diferenciadas em hepatocyte-like cells (HLCs). Para investigar essa hipótese, as HLCs serão tratadas com etoposídeo e o grau de maturação e os mecanismos envolvidos serão avaliados por citometria de fluxo, por imunofluorescência, por PCR em tempo real e por RNA-Seq. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

TELLES-SILVA, KAYQUE ALVES; PACHECO, LARA; CHIANCA, FERNANDA; KOMATSU, SABRINA; CHIOVATTO, CAROLINE; ZATZ, MAYANA; GOULART, ERNESTO. iPSC-derived cells for whole liver bioengineering. FRONTIERS IN BIOENGINEERING AND BIOTECHNOLOGY, v. 12, p. 8-pg., 2024-02-07. (22/08157-5, 21/11872-5, 19/19380-4, 13/08028-1)

TELLES-SILVA, KAYQUE ALVES; PACHECO, LARA; KOMATSU, SABRINA; CHIANCA, FERNANDA; CAIRES-JUNIOR, LUIZ CARLOS; ARAUJO, BRUNO HENRIQUE SILVA; GOULART, ERNESTO; ZATZ, MAYANA. pplied Hepatic Bioengineering: Modeling the Human Liver Using Organoid and Liver-on-a-Chip Technologie. FRONTIERS IN BIOENGINEERING AND BIOTECHNOLOGY, v. 10, FEB 14 2022. (19/18469-1, 21/04113-0, 19/19380-4, 17/16283-2, 13/08028-1, 21/04121-3)