Efeito do enriquecimento da saliva com CaneCPI-5, Stn15pSpS ou hemoglobina, isoladas ou combinadas, associadas ou não ao EGCG, na espessura, propriedades viscoelásticas, carga interfacial e morfologia da película adquirida do esmalte

• Processo: 21/00203-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2021
• Data de Término da vigência: 10 de junho de 2024
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Odontologia Social e Preventiva
• Pesquisador responsável: Marília Afonso Rabelo Buzalaf
• Beneficiário: Talita Mendes Oliveira Ventura
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/26070-1 - Modulação da película adquirida do esmalte e do biofilme para o controle da perda mineral dentária: desvendando mecanismos e possibilitando terapias, AP.TEM
• Auxílio(s) vinculado(s): 25/06176-0 - 2025 IADR/PER General Session & Exhibition, AR.EXT
• Assunto(s): Bioquímica Saliva Hemoglobinas Película adquirida Esmalte dentário Desgaste dos dentes Cistatinas Viscoelasticidade Microscopia eletrônica de transmissão
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cistatina | Egcg | Estaterina | hemoglobina | película adquirida | saliva | Bioquímica

Resumo

A Película Adquirida do Esmalte (PAE) é um dos fatores protetores contra o Desgaste Dentário Erosivo (DDE) e a cárie dentária. Dentre as proteínas da película adquirida com potencial para se ligar ao esmalte e propriedades ácido-resistentes, identificamos recentemente a cistatina, a hemoglobina (Hb) e a estaterina. A modificação do perfil proteico da PAE pela incorporação de proteínas pode interferir na colonização bacteriana inicial do biofilme, alterando sua estrutura. Portanto esta modificação é promissora não apenas para o controle do DDE, mas também para o controle da cárie dentária. Neste sentido, o presente projeto de pesquisa, inserido na "Engenharia de película adquirida", pretende avaliar o efeito do enriquecimento da saliva com CaneCPI-5, peptídeo derivado da estaterina (Stn15pSpS) ou hemoglobina (Hb), isolados ou combinados, associados ou não ao epigallo catechin gallate (EGCG), na espessura, propriedades viscoelásticas, carga interfacial e morfologia da PAE. A análise em tempo real da interação entre as proteínas estudadas, associadas ou não ao EGCG, e a hidroxiapatita, será feita utilizando uma balança de cristal de quartzo com monitoramento de dissipação (QCM-D). Para tanto, será utilizado um sistema Q-Sense E4, com sensores de hidroxiapatita (QXS327). As proteínas isoladas ou combinadas, em concentrações determinadas em experimentos prévios, associadas ou não ao EGCG (1,25 mM), serão inclusas em pool de saliva humana, que será adicionado à célula do sensor de hidroxiapatita, num fluxo de 200 µL/min, por 5 min. Então, o fluxo será reduzido para 10 µL/min e a adsorção será monitorada por 55 min. A fim de remover a saliva, será adicionada água à célula, a um fluxo de 200 µL/min por 5 min, após o que o fluxo será reduzido para 10 µL/min por 25 min. A eluição do filme adsorvido será feita pela adição de dodecil sulfato de sódio 0,5%, a um fluxo de 200 µL/min por 5 min. O software Q-Tools será utilizado para obtenção da espessura, módulo de elasticidade e viscosidade da PAE. A análise da carga interfacial da PAE será feita durante estágio BEPE junto à Saarland University, utilizando um dispositivo eletrocinético desenvolvido in-house. A PAE será formada por 90 min a partir de saliva humana acrescida das proteínas de interesse, isoladas ou combinadas, associadas ou não ao EGCG, ao longo de um canal de transmissão formado pelas superfícies de substratos de SiO2. A magnitude e sinal da corrente de transmissão medida serão determinados pela distribuição espacial de cargas e penetração hidrodinâmica na camada da PAE. Por fim, a morfologia e espessura da PAE formada in situ por 30 min após tratamento do esmalte bovino com as proteínas isoladas ou combinadas, associadas ou não ao EGCG (bochecho por 1 min), submetida ao desafio erosivo com ácido cítrico 1% pH 2,5 por 10 segundos ou HCl 0,01 M pH 2,0 por 10 segundos, será avaliada por microscopia eletrônica de transmissão (TEM). Os dados serão checados em relação à normalidade e homogeneidade, para emprego do teste estatístico apropriado (paramétrico ou não, p<0,05). Estas etapas são cruciais para que possa ser desenvolvido um produto, baseado em uma destas proteínas ou na combinação das mesmas, associadas ou não ao EGCG, que venha a ser utilizado em ampla escala como uma nova abordagem para o controle do DDE e da cárie dentária, com base em procedimentos de "Engenharia de película adquirida". (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

TAIRA, EVEN AKEMI; FERRARI, CAROLINA RUIS; CARVALHO, GABRIEL; PELA, VINICIUS TAIOQUI; VENTURA, TALITA MENDES OLIVEIRA; CRUSCA, EDSON; MARCHETTO, REINALDO; BUZALAF, MARILIA AFONSO RABELO. Statherin-Derived Peptide Protects against Intrinsic Erosive Enamel Wear in situ. Caries Research, v. N/A, p. 6-pg., 2024-09-12. (19/24295-6, 18/12041-7, 21/00203-5, 19/26070-1, 17/04857-4, 18/18749-1)