Engenharia de película adquirida para o controle da erosão dentária: efeito de bochecho com peptídeo derivado da estaterina no perfil proteômico da película adquirida do esmalte formada em 3 minutos.

Resumo

O projeto terá como principal objetivo avaliar o perfil proteômico da película adquirida no que tange à incorporac'ao de ativos em soluc'oes para bochecho o qual pode favorecer a habilidade da pelicula adquirida do esmalte (PAE) em proteger contra a erosao. Em experimentos preliminares do nosso grupo, a estaterina foi recentemente identificada como uma proteina da PAE resistente a remoc'ao por HCl, tanto no pH 1 quanto no pH 2, mesmo na PAE formada a curto prazo. Em adic'ao, a estaterina encontra-se reduzida em 35% na PAE de pacientes com erosao dentaria. Esta é uma proteína de 43 resíduos de aminoácidos. É uma proteína de sequência primária similar à osteopontina e caseína, com capacidade de ligação ao cálcio. Sua densidade de cargas negativas e conformação helicoidal na região N-terminal são importantes para a interação com a hidroxiapatita (Raj et al., 1992), o que tem sido confirmado em experimentos envolvendo ressonância magnética nuclear de estado sólido (Naganagowda et al., 1998). Em adição, um estudo in vitro relatou que são necessários pelo menos 15 resíduos N-terminais (StN15) ou mais em peptídeos derivados da estaterina para que haja redução da desmineralização do esmalte (Shah et al., 2011). Desta forma, seria interessante o conhecimento de como este peptídeo será incorporado na película adquirida, e se a presença deste aditivo, alterará de forma significante o seu perfil protêomico, principalmente em uma película de curto prazo de formação, já que em estudos prévios a estaterina se mostra uma proteína precursora. O presente estudo as coletas serao realizados em 4 dias consecutivos (para cada tipo de tratamento). Em cada dia, os voluntarios (n=9) serao submetidos a uma profilaxia dentaria com pedra pomes, apos a profilaxia, sera realizado um bochecho com 10 ml de solução tampao fosfato com o peptídeo StN15 (concentração de 1,88x10-5 M determinada em estudos prévios ainda não publicados, feito pelo nosso grupo de pesquisa, cujo estudo in vitro verificou que essa concentração foi mais eficaz na proteção contra erosão inicial por ácido clorídrico) ou com tampão fosfato sem Peptídeo StN15 (DpSpSEEKFLRRIGRFG). A pelicula adquirida sera formada naturalmente sobre o esmalte durante um periodo de 3 min. Na sequencia, a película sera removida com um papel de filtro umedecido em acido citrico a 3%. Apos extrac'ao das proteinas, as mesmas serao submetidas a cromatografia liquida de fase reversa interligada a um espectrometro de massas (nLC-ESI-MS/MS). Quantificac'ao proteomica livre de marcadores sera feita utilizando o software (PLGS).