Atuação das polimerases de síntese translesão pol º e pol ¹ na replicação e sobrevivência de células após irradiação com luz UVC

• Processo: 20/15371-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2021
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Carlos Frederico Martins Menck
• Beneficiário: Abu-Bakr Adetayo Ariwoola
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/19435-3 - Papel de danos no DNA e função mitocondrial em envelhecimento vascular, imune e neurológico (DNA MoVINg), AP.TEM
• Assunto(s): Reparo do DNA Dano ao DNA DNA polimerase dirigida por DNA Glioma
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: polimerases | reparo de DNA | Síntese Translesão | Uvc | Reparo de DNA

Resumo

A luz UVC (200-280 nm) é absorvida pela molécula de DNA gerando, principalmente, dois tipos de lesões: dímeros de pirimidina ciclobutano e fotoprodutos (6-4)-pirimidina-pirimidona, que distorcem a fita de DNA. Esses danos, quando não são removidos pelos sistemas de reparo de DNA, podem levar à parada e, consequentemente, ao colapso da forquilha de replicação do DNA. Porém, esse fenômeno é evitado graças à presença de DNA polimerases especializadas, capazes de sintetizar DNA através do dano, dando a célula certa tolerância à lesão, em processo denominado síntese de translesão. O principal objetivo do presente projeto será avaliar o papel de duas DNA polimerases translesão específicas (polimerase kappa, pol º, e polimerase iota, pol ¹ na replicação e sobrevivência de células após irradiação de células deficientes para essas polimerases. Dispomos de linhagens de células de glioma nocaute para as polimerases pol º ou pol ¹, que serão avaliadas inicialmente quanto a sua sensibilidade à irradiação com luz UVC. Sensibilidade a essa irradiação pode indicar a participação dessas polimerases na replicação das lesões induzidas no DNA. Além disso, pretendemos estudar o estresse genotóxico causado nessas células e seu impacto na indução de morte celular. Além disso, avaliaremos diretamente a atividade da forquilha de replicação frente às lesões, através de ensaios de fibra de DNA. Por fim, como pol kappa já foi identificada como responsável pela síntese de DNA durante a remoção das lesões pretendemos avaliar a contribuição dessas polimerases diretamente no processo de reparo de excisão de nucleotídeos de lesões causadas por luz UVC. (AU)