LsfA na inflamação: papéis de uma proteína antioxidante em mediadores lipídicos pró-inflamatórios e pró-resolução

• Processo: 21/11077-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Luis Eduardo Soares Netto
• Beneficiário: Rogério Luis Aleixo Silva
• Supervisor: Jesmond Dalli
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Queen Mary University of London, Inglaterra
• Vinculado à bolsa: 20/00845-4 - Desvendando o papel biológico de LsfA, uma 1-Cys Prx envolvida na virulência de P. aeruginosa, BP.DR
• Assunto(s): Inflamação Mediadores lipídicos Antioxidantes Proteínas Oxidantes Pseudomonas aeruginosa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Antioxidant protein | inflammation | lipid mediators | LsfA | Specialized pro resolving mediators | Inflamação

Resumo

Pseudomonas aeruginosa é um patógeno oportunista e ubíquo, que é exposto a um burst oxidativo, dentre outros estresses, durante a invasão do hospedeiro. Para superar esse desafio, a bactéria utiliza um conjunto de proteínas antioxidantes, que inclui LsfA, uma peroxirredoxina envolvida com a virulência de P. aeruginosa, capaz de reduzir H2O2 e outros hidroperóxidos à constantes extremamente altas. Dessa maneira, LsfA protege a bactéria contra oxidantes derivados da NOX-2, interferindo em processos redox na interface patógeno/hospedeiro. Camundongos infectados com a bactéria sem a presença de LsfA apresentaram ativação da via de NF-º², aumento na produção de TNF-± e aumento no recrutamento de neutrófilos. É importante destacar que as peroxirredoxinas podem também reduzir hidroperóxidos de ácidos graxos gerados pelas lipoxigenases (5-LOX, LOX-12) e ciclooxigenases (COX-2) cujos genes são regulados por NF-º². Mediadores lipídicos gerados pelas lipoxigenases e ciclooxigenases são conhecidamente reguladores de processos pró-inflamatórios e pró-resolução, assim como as lipoxinas e resolvinas. Com isso, nosso objetivo é entender como LsfA interfere com a produção de oxidantes e mediadores lipídicos pelo hospedeiro. Nós pretendemos verificar se os hidroperóxidos gerados nas vias dos mediadores lipídicos são reduzíveis por LsfA em sistemas enzimáticos. Além disso, pretendemos caracterizar a cinética dessa reação. Por fim, faremos a co-incubação de macrófagos diferenciados (M1 ou M2) com linhagens de P. aeruginosa (WT ou ”lsfA) e quantificar a produção de mediadores lipídicos por LC-MS-MS para identificar quais vias LsfA pode estar afetando. (AU)