Desvendando o papel biológico de LsfA, uma 1-Cys Prx envolvida na virulência de P. aeruginosa

• Processo: 20/00845-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Vigência (Início): 01 de julho de 2020
• Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2023
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Luis Eduardo Soares Netto
• Beneficiário: Rogério Luis Aleixo Silva
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/07937-8 - Redoxoma, AP.CEPID
• Bolsa(s) vinculada(s): 21/11077-0 - LsfA na inflamação: papéis de uma proteína antioxidante em mediadores lipídicos pró-inflamatórios e pró-resolução, BE.EP.DR
• Assunto(s): Estresse oxidativo Pseudomonas aeruginosa Virulência Peroxirredoxinas Cistatinas Enzimas antioxidantes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: peroxirredoxina | Pseudomonas aeruginosa | 1-Cys | Biologia Redox

Resumo

Pseudomonas aeruginosa é uma gamma-proteobacteria ubíqua, principal causa de infecção hospitalar dentre todos os patógenos relacionados com Pneumonia em UTI. Dentre os vários mecanismos de defesa do hospedeiro contra patógenos, temos interesse na liberação de oxidantes pelos fagócitos. LsfA pertence à família das peroxirredoxinas (Prx) e ao subgrupo de Prxs que contém somente uma cisteína catalítica. Prxs são enzimas capazes de reduzir peróxidos (inclusive peroxinitrito) em velocidades muito elevadas. Como LsfA está relacionada com a virulência de P. aeruginosa, durante o meu mestrado realizei estudos caracterizando bioquímica e estruturalmente essa enzima antioxidante. Dentro desse contexto, o objetivo do presente trabalho é avançar ainda mais nessa caracterização, agora determinando constantes da reação de LsfA com peróxidos orgânicos de ocorrência biológica. Além disso, procuraremos também relacionar essas informações cinéticas com a investigação do papel que LsfA desempenha na resposta de P. aeruginosa a distintos oxidantes. Também pretendemos identificar o(s) redutor(es) biológico(s) de LsfA, e se possível determinar a estrutura cristalográfica dessa enzima antioxidante complexada com os mesmos. Tendo caracterizado LsfA em detalhes, poderemos realizar buscas por possíveis inibidores de LsfA, com ensaios in vitro e in vivo daquelas moléculas que forem promissoras. Entre as análises de LsfA em sistemas celulares, pretendemos verificar: (a) a expressão dessa proteína em resposta a diferentes tipos de estresse oxidativo; (b) a importância de LsfA na fisiologia da bactéria; (c) possíveis parceiros celulares; (d) sobrevivência de linhagens de P. aeruginosa com mutações no gene de LsfA em co-culturas de bactérias e neutrófilos. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DE OLIVEIRA, MARCOS ANTONIO; TAIRUM, CARLOS A.; SOARES NETTO, LUIS EDUARDO; PIRES DE OLIVEIRA, ANA LAURA; ALEIXO-SILVA, ROGERIO LUIS; MONTANHERO CABRERA, VITORIA ISABELA; BREYER, CARLOS A.; DOS SANTOS, MELINA CARDOSO. Relevance of peroxiredoxins in pathogenic microorganisms. Applied Microbiology and Biotechnology, v. 105, n. 14-15, JUL 2021. (20/00845-4, 17/06263-4, 13/07937-8, 20/02868-1, 16/15849-0, 11/13500-6, 17/19942-7, 19/04054-4)

SILVA, ROGERIO ALEIXO; DOMINGOS, RENATO; NETTO, LUIS. Specific reduction of a 1-Cys Prx from Pseudomonas aeruginosa by ascorbate. FASEB JOURNAL, v. 35, p. 2-pg., 2021-05-01. (13/07937-8, 20/00845-4)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SILVA, Rogério Luis Aleixo. Desvendando o papel biológico de LsfA, uma 1-Cys Prx envolvida na virulência de Pseudomonas aeruginosa. 2023. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Biociências (IBIOC/SB) São Paulo.