Avaliação do efeito de anticorpos murinos contra peptídeos bacterianos associados a resistência a antimicrobianos

• Processo: 24/18277-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Estímulo a Vocações Científicas
• Data de Início da vigência: 23 de fevereiro de 2025
• Data de Término da vigência: 11 de abril de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Pesquisador responsável: Priscilla Christina Olsen
• Beneficiário: Gabriele Santos Cepinho
• Instituição Sede: Faculdade de Farmácia. Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ). Ministério da Educação (Brasil)
• Assunto(s): Imunologia molecular Anticorpos Peptídeos Bactérias gram-negativas Resistência microbiana a medicamentos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpos | Bomba de efluxo | Gram-negativa | peptídeo | resistencia antimicrobiana | Imunologia celular e molecular

Resumo

A propagação de bactérias resistentes aos antimicrobianos se tornou um sério problema de saúde pública no mundo todo. O arsenal de antimicrobianos existentes está se tornando obsoleto e o desenvolvimento de novos antimicrobianos está num ritmo extremamente desacelerado. É necessário investir em abordagens alternativas para o tratamento de infecções causadas por estas bactérias. Uma abordagem que pode ser explorada é a utilização de anticorpos contra alvos específicos que estejam superexpressos em bactérias resistentes a antimicrobianos. Neste projeto utilizaremos como alvo a proteína de membrana externa TolC, que compõe a bomba de efluxo de bactérias Gram-negativas, a qual é superexpressa na presença da pressão seletiva induzida por antimicrobianos. Recentemente, verificamos que a proteína TolC de Escherichia coli é imunogênica, sendo capaz de estimular macrófagos, linfócitos T e linfócitos B, acarretando a produção de anticorpos em camundongos. Os anticorpos anti-TolC tiveram papel protetor contra a infecção de E. coli, atuando através do aumento da opsonofagocitose. Visto que a porção extracelular da proteína TolC é o principal alvo de anticorpos, investigaremos nesse projeto o efeito dos peptídeos que constituem a porção extracelular da proteína TolC na indução de anticorpos protetores contra E. coli multirresistente a antimicrobianos (MDR). Desta forma, a aluna envolvida no projeto receberá treinamento para avaliar a expressão de TolC em diferentes cepas de E. coli, através de RT-PCR, e para manipular os camundongos imunizados com o peptídeo da TolC de E. coli (Ec01), a fim de obter anticorpos séricos e testar a capacidade destes em ligar com afinidade na TolC, através dos ensaios de Western blotting e ELISA. Além de aprender métodos importantes para diversas subáreas da Imunologia e Microbiologia, a aluna participará de discussões de artigos científicos de relevância e impacto, com intuito de treinar sua capacidade crítica-analítica. (AU)