Avaliacao in vitro da proliferacao e expressao de proteinas pelas celulas mesenquimais derivadas da medula ossea de cao em diferentes condicoes de cultura

• Processo: 08/53582-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Geral
• Pesquisador responsável: Sandra Helena Penha de Oliveira
• Beneficiário: Renato Colenci
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOA). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araçatuba. Araçatuba , SP, Brasil
• Assunto(s): Cultura de células Células-tronco mesenquimais Fator de crescimento transformador beta Cães Proliferação celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cao | Celulas Tronco Mesenquimais | Cultura De Celulas | Fgf B | Proliferacao Celular | Tgf Beta

Resumo

Este trabalho tem como objetivo avaliar, in vitro, o papel do bFGF e/ou TGF-? sobre a proliferação e diferenciação de células-tronco mesenquimais originárias da medula Óssea de cães, sob diferentes condições de cultura. Serão utilizados 12 cães adultos jovens, sem raça definida, com idade aproximada de 1 ano, sendo que o material da medula óssea será obtido por aspiração na região da crista do osso ilíaco dos cães. As células-tronco mesenquimais serão separadas pelo método de purificação utilizando-se Ficoll-PaqueTM Plus. Posteriormente as células serão cultivadas em diferentes condições de cultura. Serão utilizados meio de Dulbecco's modificado por Eagle (D-MEM) ou meio basal para células mesenquimais (MSCGM hMSC) para a proliferação das células. Após a terceira passagem, as células serão plaqueadas e estimuladas com os fatores de crescimento TGF-? e/ou FGF básico nas concentrações de 1, 5 ou 10 ng/mL durante 14 dias. Culturas que não possuem fatores de crescimento serão utilizadas como controle. O ensaio utilizando-se índice de incorporação de Bromodeoxiuridina (BrdU) será realizado para verificar a proliferação celular em cada cultura. A técnica de Imunohistoquímica será realizada para verificar a diferenciação das células mesenquimais em fibroblastos nas culturas estimuladas por TGF-? e/ou FGF básico. Será utilizado teste t de student (ANOVA) com correção de Bonferroni para determinar a significância da diferença entre os grupos do mesmo ensaio. (AU)