Caracterização molecular e funcional de proteínas que compõem o complexo spliceosomal em tripanosomatídeos

• Processo: 08/56226-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Regina Maria Barretto Cicarelli
• Beneficiário: Daniela Luz Ambrósio Breisch
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Trans-splicing Ribonucleoproteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ribonucleoproteinas | Snrnas | Spliced Leader | Spliceosomo | Trans-Splicing | Trypanosomas

Resumo

Em tripanosomatídeos, o processo de trans-splicing é responsável pelo processamento dos pré-mRNAs policistrônicos, resultando na individualização de cada gene, de modo que cada mRNA contenha a seqüência spliced leader (SL) na extremidade 5'. Esse processo requer a participação das ribonucleoproteínas (snRNPs) U2, U4/U6, U5 e SL RNP, que são constituídas por snRNAs, 7 proteínas Sm (comuns a todos) e proteínas específicas de cada partícula. Através da produção in vivo e purificação da proteína SmDI-PTP tagged, foi possível a identificação de 41 proteínas que interagem com essa partícula, das quais 16 foram anotadas como proteínas conservadas hipotéticas. Dentre essas, já foram identificados um homólogo da proteína específica U1-A, uma proteína Lsm, uma proteína U5 específica e duas proteínas que não se ligam diretamente a esses snRNAs, mas que provavelmente participam do mecanismo, como fatores de splicing. A identificação das outras 11 proteínas hipotéticas conservadas está em andamento. Sendo assim, este projeto tem como objetivo a análise de funcionalidade destas 16 proteínas, utilizando RNAi e primer extension para a verificação da essencialidade para a sobrevivência do parasita e funcionalidade na reação de trans-splicing e a imunolocalização das mesmas, com o intuito de identificar novos possíveis pontos de ataque quimioterápico parasita-específicos. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DA SILVA, MARCO TULIO A.; AMBROSIO, DANIELA L.; TREVELIN, CAROLINE C.; WATANABE, TATIANA F.; LAURE, HELEN J.; GREENE, LEWIS J.; ROSA, JOSE C.; VALENTINI, SANDRO R.; CICARELLI, REGINA M. B.. New insights into trypanosomatid U5 small nuclear ribonucleoproteins. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, v. 106, n. 2, p. 130-138, MAR 2011. (08/56226-9, 07/07476-0, 06/05766-8)