Utilizacao da tecnica de rna de interferencia (rnai) para avaliar a participacao do receptor purinergico p2x4 na diferenciacao neuronal in vitro.

• Processo: 04/10606-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2005
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2007
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Alexander Henning Ulrich
• Beneficiário: Camila Galvão Lopes
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 01/08827-4 - Modulação artificial da diferenciação neuronal e função de receptores por oligonucleotídeos sintéticos atuantes aos níveis gênico e protéico, AP.JP
• Assunto(s): Diferenciação neuronal Neurobiologia RNA Biologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia Molecular | Celulas P19 | Diferenciacao Neuronal | Neurobiologia | Receptor Purinergico | Rna

Resumo

O desenvolvimento do sistema nervoso de vertebrados é baseado no desenvolvimento e proliferação de células neuroepitelials conforme o padrão temporal de expressão gênica. Este processo é altamente controlado e envolve a ação de fatores de diferenciação, peptídeos, proteínas e receptores que desencadeiam importantes mudanças morfológicas e moleculares, as quais acabam resultando num sistema nervoso funcional (Matsas, 1997; McKay, 1997). Sabemos receptores purinérgicos estão envolvidos na diferenciação tecidual, (Ryten e cols, 2002) e acreditamos que os receptores purinérgicos possam estar envolvidos na diferenciação neuronal. O receptor purinérgico P2X4 é expresso no sistema nervoso e pouco sensível ao antagonista suramina e ao agonista me ATP e a 2-me ATP, agonistas e antagonistas purinérgicos. Dados do laboratório demonstram que a expressão do receptor P2X4 é regulada durante a diferenciação neuronal in vitro das células P19. Este receptor foi detectado em células indiferenciadas por RT-PCR e imunofiuorescência, tendo redução de sua expressão nos estágios neuronais de diferenciação e voltando a ser detectado em fases do processo onde há em cultura neurônios e glias. O α, β-metileno ATP em experimentos realizados provocou a redução de tamanho de corpos embriônicos atuando na fase de early differentiation. Como não existem inibidores específicos para P2X4 algumas ferramentas como SELEXe RNAI tornam-se importantes, pois agem de forma específica na proteína e no mRNA respectivamente. Neste projeto o desenvolvimento do RNAi nesses receptores possibilita estudos sobre participação do receptor P2X4 do modelo diferenciação neuronal in vitro de células P19. (AU)