Emprego de um vetor adenovírus recombinante contendo o gene fotoliase-EGFP no estudo de sinalização de apoptose por luz UV

• Processo: 03/04532-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2003
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Carlos Frederico Martins Menck
• Beneficiário: Vanessa Chiganças
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/11119-7 - Reparo de DNA lesado e conseqüências biológicas, AP.TEM
• Assunto(s): Apoptose Adenovirus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Apoptose | Fotoliase | Fotoprodutos | Reparo | Transcricao | Ultravioleta

Resumo

Os dímeros de pirimidina cidobulano (CPDs) são as principais lesões geradas no DNA por irradiação UV. interferindo com diferentes processos na célula, como replicação, transcrição, podendo também ocasionar a geração de mutações na seqüência de DNA e induzir morte celular por apoptose. Pretendemos estudar a resposta apoptótica em células humanas primárias, à luz UV, utilizando um vetor adenovírus recombinante expressando uma enzima CPD-fotoliase fusionada com a proteína repórter EGFP (vetor Adphr-EGFP), uma enzima que reconhece e repara especificamente lesões CPDs. Em células infectadas com este vetor Adphr-EGFP, pretende-se investigar o acesso a lesões CPDs in vivo pela enzima fotoliase e por enzimas participantes do reparo por excisão de nucleotídeos da célula, de modo a compreender deficiências em reparo de DNA e indução de apoptose por UV em células de pacientes Xeroderma pigmertosum e sindrome de Cockayne. (AU)