Ativação dos fatores de transcrição em células INS-1 e RINm5f superexpressando enzimas antioxidantes tratadas com citocinas e ácidos graxos

• Processo: 01/12608-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2002
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Rui Curi
• Beneficiário: Anna Karenina Azevedo Martins
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/11714-2 - Lípides como mediadores das interações intercelulares, AP.TEM
• Assunto(s): Ácidos graxos Citocinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Acidos Graxos | Citocinas

Resumo

A destruição de células beta através de citocinas citotóxica leva ao desenvolvimento de diabetes mellitus. Este processo é mediado pela ativação de fatores de transcrição, particularmente NFk-B. Além disso, o mesmo está relacionado com mudanças no estado redox intracelular, sendo que células beta representam alvos fáceis já que apresentam baixa atividade das principais enzimas antioxidantes. Neste contexto, usando clones de células RINm5F que superexpressam CAT, GPx, CuZnSOD, MnSODsense ou antisense e células controle, uma das propostas deste projeto é o de investigar o papel desempenhado por estas enzimas no processo de ativação de fatores de transcrição. Em estudos recentes foi demonstrado que os ácidos graxos incorporados pelas células em cultura influenciam o estado redox e o processo de ativação de fatores de transcrição. Sendo assim, no presente projeto, será também estudado o efeito de ácidos graxos na ativação de fatores de transcrição e sua interação com citocinas. Para a realização desse estudo, serão utilizadas as seguintes metodologias: ensaios de gene repórter e de retardamento de banda e Western blot e também técnicas inovadoras como um ensaio de ELISA adaptado para fatores de transcrição o que permite quantificar a ativação de tais fatores. Com os resultados obtidos no presente estudo será possível esclarecer aspectos do processo que leva à morte celular e assim traçar ou aperfeiçoar procedimentos de proteção das células beta. (AU)