Potenciais marcadores prognósticos e a relação epigenética na tumorigênese de melanomas cutâneos primários e metastáticos

Autor(es)

Camilla Borges Ferreira Gomes

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2016-01-22

Membros da banca

Karina Gottardello Zecchin; Andreia Bufalino; Marianne de Vasconcelos Carvalho; Maria Letícia Cintra; Aparecida Machado de Moraes

• Orientador: Karina Gottardello Zecchin

Resumo

O desenvolvimento do Melanoma tem sido relacionado à exposição à radiação ultravioleta, mas uma série de alterações genéticas e epigenéticas também parecem estar envolvidas em sua patogênese. Estudos prévios mostram que a inibição da enzima ácido graxo sintase (FASN - fatty acid synthase) reduz a proliferação de células de melanoma através de alterações nas proteínas envolvidas na transição das fases G0/G1 para S do ciclo celular. Recentemente, verificou-se que a perda do marcador epigenético 5-hidroximetilcitosina (5-hmC) regulado pela família TET (ten-eleven translocation), resulta em aumento dos níveis da proteína do filamento intermediário, nestina, associada a progressão tumoral e pior prognóstico em melanomas. Este estudo apresenta dois principais objetivos: (i) avaliar a expressão de FASN, proteínas do ciclo celular, CD34 (marcador vascular) e Ki67 (índice proliferativo) em melanomas cutâneos primários (MCP) e melanomas metastáticos (MM), correlacionando-os com dados clínicos, histopatológicos e taxas sobrevida; (ii) avaliar a regulação epigenética de nestina através da via TET2/5-hmC, e correlacioná-los com a progressão e prognóstico desta neoplasia. MCP e MM foram organizados em microarranjos teciduais e submetidos a reações de imunoistoquímica (IHQ) contra FASN, Cdk-4, p16Ink4a, p21WAF1/Cip1, p27Kip1, Rb, CD34 e Ki-67. IHQ e imunofluorescencia (IF) contra nestina e 5-hmC foram realizadas, avaliando-se a expressão de nestina com a perda de 5-hmC nos melanoma selecionados. Além disso, observamos os efeitos de 5-hmC sob nestina, através do aumento de TET2 em melanomas in vitro e pelo sequenciamento gênico por imunoprecipitação DNA metilado (hMeDIP-seq) de 5-hmC em nevos e melanomas. A sobrevida global (SG) dos casos de MCP foi significativa para fatores prognósticos como índice mitótico, estágio clínico e, discretamente, espessura de Breslow; também foi relevante para uma expressão aumentada de Cdk-4, FASN e CD34. E uma correlação significantemente positiva foi encontrada entre FASN e CD34. A SG dos MM mostrou-se reduzida diante do aumento de Cdk-4, p21WAF1/Cip1, p27Kip1, Rb e foi marginalmente significativa para p16 Ink4a. FASN, p21 WAF1/Cip1 e Rb apresentaram maiores valores nos casos de MM, quando comparados aos primários. IHQ e IF revelaram importante correlação negativa na expressão de nestin e 5-hmC. Relevante redução na expressão de nestina em melanomas com a reintrodução de TET2 in vitro, restabelecendo 5-hmC nessas células, foi encontrada. Em conjunto, estes resultados sugerem que FASN, p16Ink4a, Cdk-4 e CD34 são possíveis fatores prognóstico na progressão do melanoma. FASN mostrou correlação positiva com CD34, sugerindo que a expressão de FASN está associada à neoformação vascular em melanomas. A regulação epigenética de nestina na progressão tumoral pode estar relacionada aos efeitos de TET2 mediados por 5-hmC. Mais estudos são indicados para definir a progressão tumoral associada a perda de 5hmC, incluindo aquelas relacionadas a células-tronco cancerígenas no melanoma (AU)

• Processo FAPESP: 12/14008-0 - Correlação entre prognóstico de melanoma maligno humano e expressão da enzima ácido graxo sintase e de proteínas envolvidas no ciclo celular e na angiogênese
• Beneficiário: Camilla Borges Ferreira Gomes
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado