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Avaliação do papel das plaquetas na anemia falciforme

Texto completo
Autor(es):
Hanan Chweih
Número total de Autores: 1
Tipo de documento: Tese de Doutorado
Imprenta: Campinas, SP.
Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Médicas
Data de defesa:
Membros da banca:
Nicola Amanda Conran Zorzetto; Cristina Pontes Vicente; Alessandra Gambero; Claudia Regina Bonini Domingos; Sandra Fatima Menosi Gualandro
Orientador: Nicola Amanda Conran Zorzetto
Resumo

A anemia falciforme (AF) resulta da homozigose de uma mutação de ponta no gene HBB, resultando na produção da cadeia ß-globina alterada (ßS). A doença é caracterizada por anemia hemolítica crônica, crises dolorosas de vaso-oclusão, lesões de órgãos-alvo e um estado inflamatório crônico. Pacientes com AF apresentam contagens elevadas de leucócitos, e evidências indicam a participação dos leucócitos no início e propagação dos processos vaso-oclusivos, pois estas células são relativamente grandes e rígidas, fazendo com que seu recrutamento para a microcirculação reduza o fluxo sanguíneo nos vasos. O papel das plaquetas no processo vaso-oclusivo é pouco conhecido, apesar de sabermos que há ativação das plaquetas na AF. Sendo assim, este projeto teve como principal objetivo avaliar o papel das plaquetas no processo vaso-oclusivo, estimulado pela citocina TNF, em camundongos quimeras para AF, visualizando e diferenciando as células participantes deste processo inflamatório. Adicionalmente, o efeito da depleção ou diminuição da atividade das plaquetas na resposta inflamatória causada por TNF em camundongos com AF foi verificado. No decorrer deste projeto, realizamos as técnicas de transplante de medula óssea de camundongos transgênicos Berkeley para camundongos C56BL/6 (com o intuito de produzir camundongos quimeras por AF e aumentar a colônia de animais com AF), além de microscopia convencional intravital e microscopia intravital confocal da microcirculação do musculo cremaster com marcação fluorescente para plaquetas e leucócitos. Nós verificamos que, após estímulo dos animais AF com TNF, a plaqueta atua como primeiro sinal da resposta inflamatória, possuindo a função de recobrir o endotélio inflamado da microcirculação e então recrutando leucócitos (com ambos, alta e baixa expressão da molécula Ly6G), tanto em animais controles como em animais AF. Além disso, em associação ao aumento da adesão de plaquetas a parede vascular, houve uma redução da velocidade do fluxo sanguíneo destes animais e da sua sobrevida. Verificamos que tratamentos capazes de diminuir a quantidade de plaquetas ou a ativação plaquetária (uso de anticorpo anti-CD42b e prasugrel, respectivamente) foram capazes de reduzir, ou até reverter, o recrutamento de plaquetas e leucócitos na microcirculação e, portanto, os processos vaso-oclusivos em camundongos AF. A administração de hidroxiureia em animais AF reduziu o recrutamento das plaquetas e dos leucócitos e a formação de agregados plaquetas/ leucócitos na microcirculação, melhorando a velocidade de fluxo nos mesmos. Finalmente, comparamos o mecanismo de vaso-oclusão, estimulado por processos de hipóxia e reperfusão, com a vaso-oclusão induzida por TNF; apesar de um maior recrutamento de leucócitos na microcirculação destes camundongos AF, verificamos um menor recrutamento das plaquetas com menor diminuição do fluxo sanguíneo. Esses dados nos levam a concluir que a plaqueta possui um papel importante nos processos inflamatórios induzidos por TNF, iniciando e propagando os processos vaso-oclusivos em animais com AF. Apesar dos dados decepcionantes do primeiro ensaio clinico multicêntrico com prasugrel na AF, agentes antiplaquetários ainda devem ser estudados como forma de terapia em combinação, ou não, com a hidroxiureia para diminuir a frequência das crises vaso-oclusivas ou até para uso em pacientes hospitalizados por este motivo (AU)

Processo FAPESP: 15/18369-6 - Avaliação do papel das plaquetas em doenças falciformes
Beneficiário:Hanan Chweih
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado