Effect of histatin - and statherin - derived engineered salivary peptides on Streptococcus mutans adhesion and on enamel demineralization provoked by cariogenic biofilms

Autor(es)

Lina María Marín Gallón

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Piracicaba, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2019-08-30

Membros da banca

Jaime Aparecido Cury; Walter Luiz Siqueira; Karina Gonzales Silverio; Antônio Pedro Ricomini Filho; Fausto Medeiros Mendes

• Orientador: Jaime Aparecido Cury

Resumo

O biofilme dental é formado nas superfícies dentárias recobertas por uma camada de proteínas e peptídeos salivares conhecida por película de esmalte adquirida (PAE). Previamente foi demonstrado que os peptídeos salivares modificados de estaterina e histatina, DR9-DR9 e DR9-RR14, foram capazes de reduzir a desmineralização do esmalte e exibir atividade antimicrobiana contra Streptococcus mutans, respectivamente, mas em condições experimentais que não imitaram o desenvolvimento de cárie induzida por biofilme e exposição à sacarose, o açúcar mais cariogênico da dieta. Nesta tese avaliou-se o efeito dos peptídeos salivares modificados sobre 1) a aderência de S. mutans à hidroxiapatita (HAp), e 2) na redução da desmineralização do esmalte, usando um modelo validado de biofilme cariogênico de S. mutans. Nossa hipótese foi que os peptídeos DR9-DR9 e DR9-RR14 reduziriam a adesão de S. mutans e a cariogenicidade dos biofilmes, protegendo o esmalte contra a desmineralização. Para testar essa hipótese, foram realizados dois estudos in vitro. No primeiro estudo, discos de hidroxiapatita foram tratados com os peptídeos para induzir a formação de PAE e depois inoculados com S. mutans para quantificação de bactérias aderidas, e para avaliar os proteomas bacterianos totais após os períodos de adesão de 2 h, 4 h e 8 h. No segundo estudo, um modelo in vitro de biofilme cariogênico foi validado e usado para testar o efeito dos tratamentos com os peptídeos DR9-DR9 e DR9-RR14 na desmineralização do esmalte sob duas condições: 1) quando adsorvidos na superfície do esmalte, formando a PAE, e 2) quando usados para tratar os biofilmes 2x/dia. Os biofilmes foram crescidos por 144 h e foi avaliado o efeito dos peptídeos na desmineralização do esmalte, biomassa e nos proteomas bacterianos da matriz extracelular e total. Os resultados mostraram que o peptídeo DR9-DR9 reduziu a aderência de S. mutans à HAp, mas DR9-DR9 e DR9-RR14 não tiveram efeito significativo no desenvolvimento dos biofilmes cariogênicos formados. Os peptídeos modificados não modularam o proteoma bacteriano, nem quando aderidos à PAE nem quando usados para tratar os biofilmes em formação. Entretanto, DR9-DR9 e DR9-RR14 reduziram significativamente a desmineralização do esmalte, sugerindo que podem controlar o desenvolvimento de cárie através de um mecanismo físico-químico. O efeito combinatório de reduzir a aderência bacteriana e limitar a perda mineral da estrutura dentária sob alto desafio cariogênico sugere que os peptídeos modificados DR9-DR9 e DR9-RR14 representam uma nova abordagem translacional para a prevenção/tratamento da cárie dentária (AU)

• Processo FAPESP: 14/27034-5 - Suscetibilidade à cárie de dentes com fluorose e efeito do fluoreto no seu controle: estudo in vitro e in situ
• Beneficiário: Lina María Marín Gallón
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado