Caracterização de proteínas de membrana de Leptospira interrogans expressas em Escherichia coli.

Autor(es)

Renata de Siqueira Mendes

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: São Paulo.
• Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI)
• Data de defesa: 2011-08-19

Membros da banca

Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento; Waldir Pereira Elias Junior; Irene da Silva Soares

• Orientador: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento

Resumo

O sequenciamento genômico da L. interrogans sorovar Copenhageni e os avanços das análises bioinformáticas permitiram a identificação de seis novos candidatos vacinais. Esses genes de Leptospira foram submetidos a ensaios de conservação do DNA genômico, RNA mensageiro e proteína nativa correspondente em doze sorovares de Leptospira, nos quais o gene LIC11469 foi o mais conservado. As proteínas recombinantes rLIC11469 e rLIC11030 foram purificadas por cromatografia de afinidade a metal, e submetidas a ensaio de dicroísmo circular. Em ensaios de localização celular pudemos observar a presença das proteínas nativas correspondentes na membrana externa de Leptospira. Ensaios de adesão mostraram a ligação da proteína rLIC11469 à laminina e ao plasminogênio. Ensaios de imunização e desafio demonstraram que a proteína rLIC11030 conferiu proteção contra infecção letal de L. interrogans em hamsters. Ambas as proteínas apresentaram reatividade com anticorpos presentes em soros de pacientes com leptospirose, sugerindo sua expressão durante a infecção. (AU)

• Processo FAPESP: 09/02316-0 - Caracterização de proteínas de membrana de Leptospira interrogans expressas em Escherichia coli
• Beneficiário: Renata de Siqueira Mendes
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado