Texto completo
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| Autor(es): |
Fernanda Camila Zauli Fabris
Número total de Autores: 1
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| Tipo de documento: | Tese de Doutorado |
| Imprenta: | Campinas, SP. |
| Instituição: | Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Médicas |
| Data de defesa: | 2021-11-23 |
| Membros da banca: |
Nicola Amanda Conran Zorzetto;
Cristina Pontes Vicente;
Rodolfo Delfini Cançado;
Andrea Ribeiro Soares;
Sara Teresinha Olalla Saad
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| Orientador: | Nicola Amanda Conran Zorzetto |
| Resumo | |
A Doença Falciforme (DF) é causada por uma mutação genética que resulta na substituição de um único aminoácido da cadeia da ?-globina, levando à formação de uma hemoglobina anômala conhecida como hemoglobina S. Em situações de baixas concentrações de oxigê-nio, a hemoglobina se polimeriza, levando as hemácias a assumirem um formato alongado, em um evento conhecido como falcização. A angiogênese é o processo pelo qual ocorre a formação de novos vasos a partir de vasos pré-existentes. Estudos mostraram que pacientes com DF, no geral, apresentam níveis elevados de fatores angiogênicos plasmáticos e que as plaquetas de pacientes com anemia falciforme (AF) podem circular em estado ativado na circulação sanguínea. Como já é conhecido que as plaquetas funcionam como reservatórios de fatores envolvidos na inflamação e na angiogênese, o objetivo deste projeto foi avaliar o papel das plaquetas de pacientes com DF nos principais mecanismos angiogênicos das célu-las endoteliais in vitro, utilizando células endoteliais humanas de cordão umbilical (HU-VEC). As células HUVEC foram co-cultivadas com plaquetas separadas do sangue perifé-rico de pacientes portadores de AF (HbSS) e DF (HbSC), e de indivíduos sadios (HbAA) por 24 horas. A quantificação das células HUVEC em proliferação se deu através de um kit comercial (BrdU). Para avaliação da formação de estruturas tipo capilares pelas células en-doteliais (CE) utilizou-se matriz GFR-Matrigel. Os ensaios de invasão e migração foram realizados em câmara dupla de Matrigel e por meio da técnica de Scratch. A análise do se-cretoma e da expressão de receptores na superfície de plaquetas foi feita através do ensaio de multiplex e citometria de fluxo. Os resultados do estudo indicam que as plaquetas de pacientes com DF (HbSS e HbSC) e controle podem estimular a formação de estruturas capilares, a invasão e a migração das CE, in vitro. Nossos achados também demonstram que o co-cultivo de CE com plaquetas de pacientes com AF, no mesmo poço, resulta no aumen-to da capacidade de invasão das CE. Em relação a análise da secretoma das plaquetas, ob-servamos que, em 24 horas, as plaquetas de pacientes com AF secretam concentrações ele-vadas dos fatores pró-angiogênicos ANG 1, angiogenina, e PDGF AA, e do fator anti-angiogênico, endostatina. Também, mostramos que as plaquetas de pacientes com AF do nosso grupo de pesquisa apresentam um aumento na expressão do receptor de trombina, PAR-1. Nosso trabalho reforça a hipótese de que as plaquetas participam do processo an-giogênico da AF e abre perspectivas para novos estudos. Considerando que pacientes com DF possuem contagens elevadas de plaquetas, destacamos as plaquetas como um alvo tera-pêutico no tratamento da DF (AU) | |
| Processo FAPESP: | 17/11601-6 - Aspectos da angiogênese na Anemia Falciforme: o papel das plaquetas |
| Beneficiário: | Fernanda Camila Zauli Fabris |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado Direto |