Texto completo
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| Autor(es): |
Bidossessi Wilfried Hounkpe
Número total de Autores: 1
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| Tipo de documento: | Tese de Doutorado |
| Imprenta: | Campinas, SP. |
| Instituição: | Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Médicas |
| Data de defesa: | 2020-03-02 |
| Membros da banca: |
Erich Vinicius De Paula;
Nicola Amanda Conran Zorzetto;
Joyce Maria Annichino Bizzacchi;
Marcelo Torres Bozza;
Marcelo Larami Santoro
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| Orientador: | Magnun Nueldo Nunes dos Santos; Erich Vinicius De Paula |
| Resumo | |
Introdução: A anemia falciforme (AF) é uma hemoglobinopatia caracterizada por inflamação crônica e importante risco de eventos tromboembólicos venosos. Apesar dos avanços na caracterização das consequências da hipercoagulabilidade nestes pacientes, pouco se sabe sobre os mediadores críticos para ativação e perpetuação da coagulação nestes pacientes. No entanto, estudos realizados nos últimos anos sugeriram que o heme e a geração de redes extracelulares de neutrófilos (NETs) são dois elementos críticos da fisiopatologia da hipercoagulabilidade nesta doença. Embora já tenha sido demonstrado que o heme livre possa ter efeitos clinicamente relevante principalmente sobre a vasooclusão e síndrome toracica aguda via TLR4, seu efeito líquido sobre a coagulação é ainda assunto de muitas controversas. Além disso, evidências mostraram que a protéina PADI4 é um regulador crítico da formação de NETs e indicaram que sua inibição pode ser uma estratégia terapêutica no tratamento das doenças cuja fisiopatologia envolve a liberação de NETs como a AF. Embora atrativo, esta possibilidade exige um conhecimento mais detalhado do papel de PADI4 na AF. Objetivos: Na primeira parte deste estudo, nosso objetivo foi avaliar o efeito do heme sobre a ativação da coagulação no sangue total e explorar sua contribução na expressão, atividade e mecanismo de desencriptação do fator tecidual (FT) em células mononucleares. O segundo objetivo foi avaliar a expressão de genes envolvidos na formação de NETs (PADI4, MPO e Elane) em pacientes com AF e explorar suas correlações com marcadores de hipercoagulabilidade e com a gravidade da doença. Métodos: Na parte relativa aos efeitos do heme, a tromboelastometria foi usada para avaliar o efeito do heme sobre a ativação da hemostasia. Além disso a expressão do FT foi analisada por qPCR e sua atividade avaliada por um teste funcional de ativação do FX. A atividade de PDI foi avaliada usando um kit comercial. Por fim a contribuçao da via de TLR4 e o mecanismo de desencriptação mediado por PDI foram explorados usando inibidores específicos (Tak-242 e rutina para TLR4 e PDI respectivamente). Em relação à formação de NETs, duas coortes foram incluidas neste estudo. Na primeira coorte foi investigada a expressão gênica de PADI4, MPO e Elane por qPCR. Já na segunda coorte, a atividade de PADI4 foi analisada. Resultados: O heme foi capaz de induzir a ativação da hemostasia em amostras de sangue total. Este foi efeito foi amplificado pelo pré-tratamento com TNF-'alfa' e dependente da expressão e da ativação de FT, a qual foi posteriormente demonstrada em células mononucleares. A ativação do FT foi dependente da via TLR4 e ao menos parcialmente da via de desencriptação de FT mediada pela PDI. Já em pacientes com AF houve um aumento significativo da expressão dos genes PADI4, ELANE e MPO durante as crises vasoclusivas. A atividade de PADI4 aumentou no plasma de pacientes com AF durante as crises. Este resultados reforçaram o conceito de que heme e a regulação da formação de NETs pela PADI4 possam ser considerados como dois elementos relevantes da fisiopatologia da AF (AU) | |
| Processo FAPESP: | 15/24666-3 - Investigação de novos mecanismos fisiopatológicos de hipercoagulabilidade na Doença Falciforme |
| Beneficiário: | Bidossessi Wilfried Hounkpe |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |