Desenvolvimento de um sistema de trans-splicing in vitro com extratos de Trypanosoma cruzi

Resumo

Os objetivos a serem atingidos relacionam-se com a temática do estabelecimento da reação de trans-splicing in vitro utilizando extratos de tripanosomatídeos, que são preparados aqui em Araraquara e levados a Barcelona, para mapeamento das bandas mediante reação com RNAse H e transcriptase reversa (com e sem radioatividade); tal procedimento tem a finalidade de confirmar as reações de transesterificação entre os pré-mRNAs e os componentes dos extratos, na tentativa de determinar as regiões de ligação entre SL (splice leader) e RNA mensageiro propriamente dito; os mesmos extratos serão também utilizados para caracterização de ribonucleoproteínas (UsnRNPs e UsnRNAs) bem como outros fatores que podem ser requeridos para a reação in vitro. (AU)