Caracterização de ribonucleoproteínas (UsnRNPs) em extratos nucleares de tripanosomatídeos utilizados nas reações de trnas-splicing in vitro

Resumo

O projeto tem o intuito de estudar e caracterizar snRNPs de diferentes tripanosomatídeos (T. cruzi, Leishmania sp e Blastocrithidia sp) que são partículas formadas de RNA e componentes protéicos encontrados no núcleo de células eucariotas e envolvidas em diversas funções, incluindo splicing de pré-mRNA, formação de terminal 3' em mRNA de histonas, processamento de tRNA, maturação de rRNA e síntese de DNA telomérico. Utilizando o anticorpo anti-m3G (anti-trimetilguanosina), nucleotídeo presente nas UsnRNAs/UsnRNPs, em reações de imunoprecipitação tais proteínas podem ser caracterizadas em gel de poliacrilamida. UsnRNPs também estão associadas com doenças, auto-imunes, porque apresentam o domínio Sm-binding site cujo anticorpo é marcador de auto-imunidade e, a patologia da Doença de Chagas sugere uma característica similar; assim, esses estudos poderão auxiliar na tentativa de regulação do trans-splicing no parasita ou, mesmo na destruição do mesmo sem que a célula hospedeira seja atingida (possibilidade futura do uso de terapia anti-sentido, anticorpos contra peptídeos das UsnRNPs de T. cruzi, etc). Junto com isso, a análise de snRNPs dos tripanosomatídeos auxiliará na avaliação da atividade dos extratos nucleares desses parasitas na reação de trans-splicing que já está sendo desenvolvida no laboratório da proponente, dando assim continuidade ao projeto anteriormente submetido (processo 97/01891-1), desde que tais fatores são cruciais para a reação. (AU)