Estudo do envolvimento da proteína tiorredoxina no mecanismo de S-nitrosação e seu papel regulador durante a morte celular induzida por óxido nítrico

Resumo

O NO é um radical livre que possui um importante papel regulador em diferentes funções fisiológicas. Apesar de sua estrutura diatômica simples, o NO participa de um grande número de reações bioquímicas, possui diferentes alvos podendo interagir com a totalidade das estruturas celulares. Devido ao caráter nueleofílico, um dos principais alvos do NO são grupamentos sulfidrila presente em várias proteínas, podendo nitrosar resíduos de cisteína gerando SNO. Esta modificação pós-tradução é implicada diretamente na função de várias proteínas (EX, p21ras, caspase-3 e AP-1). A S-nitrosação é um processo reconhecidamente reversível, contudo, os mecanismos reguladores desta reversão ainda não estão definidos. Estudos realizados in vitro sugerem a participação da proteína TRX no mecanismo de restauração da S-nitrosação. Tanto a GSH como o fator de transcrição AP-1 quando nitrosados podem ter essa modificação pós-tradução revertida pelo sistema TRX/TRX redutase. Objetivando um melhor entendimento deste evento, nos propusemos a investigar este mecanismo utilizando células que super-expressam tiorredoxína condicionalmente. A caracterização da nitrosação será determinada peta utilização de anticorpos específicos para a detecção de proteínas nitrosadas e finalmente, associar este evento a processos de morte celular. (AU)