Controle da perda de proteínas musculares em situações catabólicas: um estudo de microdiálise

Resumo

Embora grandes avanços no conhecimento dos mecanismos envolvidos com a regulação do metabolismo de proteínas tenham sido obtidos a partir de preparações de músculos isolados de pequenos roedores, ainda há uma grande limitação metodológica na investigação do balanço proteico in vivo. Tendo em vista estas dificuldades, propomos nesse estudo a utilização de uma nova metodologia, a microdiálise, que possibilite a investigação in situ do metabolismo proteico e do fluxo sanguíneo no músculo esquelético de roedores submetidos a três modelos experimentais de catabolismo: a desnervação atrófica, a septicemia e a lesão muscular induzida por peçonha de Bothrops. Temos também como objetivo propor tratamentos e descrever os mecanismos envolvidos com a prevenção ou atenuação da perda de proteínas musculares nessas situações patológicas. Após termos demonstrado, em nossos estudos iniciais, que parte do efeito anabólico das catecolaminas em músculos de animais normais é mediado pela ativação de adrenoceptores beta-2 e produção do AMPc utilizaremos agora a microdiálise para investigar o possível efeito anabólico de agonistas beta-2 adrenérgicos (clembuterol) e de derivados de xantina (pentoxifilina e isobutilmetilxantina) na musculatura esquelética de ratos adultos desnervados e sépticos. Nessas condições, a prevenção do estado catabólico pode ser resultante da inibição de diferentes vias proteolíticas e/ou da estimulação dos processos de síntese proteica. Para a investigação desses mecanismos, o turnover de proteínas in vitro será avaliado em preparações de músculos atróficos incubados na presença do clembuterol ou dos derivados da xantina. A quantificação das proteases intracelulares será realizada por meio da técnica de Western Blot em músculos previamente incubados ou dialisados. A obtenção desses resultados contribuirá para a melhor compreensão da fisiopatologia de doenças debilitantes, assim como para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas que previnam ou atenuem a depleção de proteínas musculares. (AU)