Papel das vias de sinalização da Akt/Foxo e MEK/ERK no efeito antiatrófico mediado pelos adrenoceptores B2 em músculo esquelético de roedores

Resumo

Em experimentos anteriores, demonstramos que as catecolaminas, por meio da ativação de adrenoceptores (AR)-B2, exercem um controle anabólico no metabolismo proteico da musculatura esquelética de roedores. Embora a via clássica de sinalização intracelular do AMPc/PKA tenha sido associada a esses efeitos metabólicos, trabalhos recentes sugerem que o AMPc, via EPAC, possa recrutar 2 outras vias de sinalização envolvidas com a regulação do crescimento muscular e atrofia: Akt/Foxo e MEK/ERK. Com o objetivo de investigar a participação dessas vias de sinalização na ação antiproteolítica e pró-sintética resultante da ativação de AR-B2, serão utilizadas células musculares C2C12 e músculos esqueléticos de roedores em situações basais e atróficas (incubação com dexametasona ou jejum de 48h). Os efeitos metabólicos promovidos pelo tratamento com clembuterol (CB; agonista seletivo B2) e/ou inibidores seletivos das quinases Akt e MEK serão correlacionados com o estado de fosforilação das proteínas e expressão de genes envolvidos com os processos de síntese e degradação proteica. Utilizando agonistas e antagonistas específicos da EPAC e PKA, estudaremos também como esses efetores do AMPc interferem com essas vias de sinalização e regulam o metabolismo de proteínas. Além disso, a modulação dos diferentes componentes das vias (Akt/Foxo e MEK/ERK) e expressão dos genes pelo CB serão avaliados em músculos de animais nocautes do AR-B2 ou de PGC1-a, um coativador transcricional cujo conteúdo é aumentado pelo CB e que está envolvido com a supressão dos genes relacionados à atrofia muscular. (AU)