Estudo de mutacoes no gene nkx2.5 em pacientes com anomalias cardiacas congenitas.

Resumo

O desenvolvimento cardíaco é um processo biológico complexo e multifatorial. Alguns fatores de transcrição encontrados primariamente em moscas e camundongos (tinman, Nkx2.5, respectivamente) têm sido relacionados a este processo. Mutações heterozigóticas no fator de transcrição NKX2.5 estão entre as primeiras evidências de uma causa genética para doenças cardíacas congênitas em humanos. Objetivos: Avaliar a presença e freqüência de mutações no gene NKX2.5 de pacientes com cardiopatias congênitas específicas; Investigar correlações genótipo-fenótipo. Método: 1) Recrutamento e caracterização de 120 pacientes com as seguintes cardiopatias: comunicação interatrial, comunicação interventricular, coarctação de aorta, defeito septal átrio-ventricular, estenose aórtica, anomalia de Ebstein, estenose pulmonar, persistência do canal atrial, tetralogia de Fallot; 2) Análise do genótipo dos pacientes: 2.1) Extração do DNA das amostras; 2.2) Obtenção da condições de anelamento dos primers; 2.3) Amplificação da região NKX2.5 das amostras por PCR; 2.4) Eletroforese em Gel de Agarose dos produtos de amplificação; 2.5) dHPLC (denaturing high performance liquid chromatography) para análise de possíveis mutações nos produtos de amplificação; 2.6) Seqüenciamento das amostras que apresentarem mutações; 3) Correlação genótipo-fenótipo de pacientes com mutações. (AU)