Efeito da inibição de IL-2 com FK-506 na expressão gênica de RANKL e OPG na doença periodontal induzida por ligadura: estudo in vivo e in vitro

Resumo

Nas últimas décadas ocorreram avanços substanciais na compreensão dos eventos que controlam o sistema imune e também dos efeitos seletivos de diversas drogas, capazes de alterar a função imune produzindo controlada imunossupressão. O tacrolimus (FK-506) é uma droga imunossupressora usada na prevenção da rejeição de órgãos transplantados, possuindo atividade imunossupressora 100 vezes maior que a ciclosporina. A ação do FK-506 se baseia na ligação à uma proteína cálcio-dependente chamada ciclofilina – uma proteína intracelular de ligação da família da calmodulina (17kDa). Esta interação leva à inibição da atividade da calcineurina, prejudicando os eventos cálcio-dependentes e induzindo a redução da transcrição do gene para interleucina-2 (IL-2). Esta droga provoca, assim marcante efeito inibidor nos eventos iniciais da proliferação dos linfócitos T além de possuir ação da inibição da síntese de citocinas nos linfócitos CD4. As informações provenientes da ação do FK-506 sobre o osso de forma geral são conflitantes e inconclusivas, incluindo sugestões de favorecimento da reabsorção óssea e de favorecimento do metabolismo ósseo, promovendo diferenciação osteoblástica. A regulação do processo de remodelação óssea, tanto fisiológica quanto patológica, teve uma grande evolução nos últimos anos, com a identificação de um sistema de citocinas capaz de regular a osteoclastogênese. Este sistema de citocinas constitui um dos principais paradigmas atuais em biologia óssea, e inclui proteínas denominadas RANKL (receptor-activator of nuclear factor kappa B ligand) e OPG (osteoprotegerin). RANKL interage com seu receptor RANK, e é tanto necessário como suficiente para estimular a diferenciação de células precursoras em osteoclastos, enquanto OPG atua como falso receptor de RANKL, bloqueando e/ou dimunuindo sua atividade biológica. Recentemente verificamos em nosso laboratório que administração do FK-506 em ratos submetidos à doença periodontal resultou na inibição da evolução do processo inflamatório induzido pela instalação da ligadura e consequente inibição da reabsorção óssea. Tais resultados se basearam nos aspectos morfológicos e nas mensurações de IL-1, IL-6 e TNF (resultados preliminares). Considerando os conflitantes resultados e ausência de informações relativas à influência do FK-506 na expressão de RANKL e OPG na doença periodontal induzida, o objetivo geral deste projeto é avaliar in vivo e in vitro o papel do FK-506 (bloqueador de IL-2) na reabsorção óssea por meio de modulação da expressão de RANKL e OPG. A hipótese principal é que o FK-506 tenha um papel específico na modulação da expressão de RANKL e OPG. (AU)