Caracterização global do perfil de expressão gênica dos estágios inicial e avançado do melanoma e análise funcional de candidatos a supressor de tumor ou oncogênese: consolidando ferramentas e dados revelados em estudos prévios

Resumo

Dados prévios, resultantes da utilização de microarranjos contendo ESTs (ORESTES) que mapeiam em regiões cromossômicas associadas ao desenvolvimento do melanoma, revelaram 4 novos genes com potencial envolvimento na progressão tumoral. Além disso, foram geradas duas bibliotecas subtrativas, cuja análise inicial (20% dos clones) revelou representarem duas grandes coleções de genes com marcante expressão diferencial entre os estágios de crescimento radial e metastático do melanoma. Assim, pretendemos definir e caracterizar o papel de novos genes no desenvolvimento do melanoma a partir da utilização e análise dos dados de expressão gênica diferencial já obtidos. Para isso propomos: 1. sequenciar completamente as bibliotecas subtrativas, 2. realizar análises in silico das sequências para definição de novos genes candidatos, 3. confirmar por Northern blotting e Real-Time RT-PCR, o perfil de expressão diferencial dos genes candidatos selecionados, 4. causar interferência funcional, através da técnica de RNAi sobre os genes selecionados. (AU)