Estudo do código químico e da expressão dos receptores P2X2 E P2X7 no sistema nervoso entérico do íleo de ratos submetidos a isquemia/reperfusão intestinal de artérias ileais

Resumo

O ATP (5-adenosina trifosfato) é conhecido como um neurotransmissor e seus receptores são os da família P2X1-7 (ABBRACHIO E BURNSTOCK, 1998) e foi demonstrada a presença de receptor purinérgico P2X2-3 no sistema nervoso entérico (CASTELUCCI et al., 2002, POOLE et al., 2002; CASTELUCCI et al., 2003). No trato digestório a isquemia/reperfusão intestinal acarreta alterações morfológicas nos neurônios entéricos (LINDESTRÖM e EKBLAD, 2004), sendo que a isquemia/reperfusão intestinal é observada na isquemia mesentéria aguda e Doença de Crohn que apresentam como processos patofisiológicos a necrose do intestino. Este projeto visa estudar no sistema nervoso entérico do íleo animais submetidos a isquemia/reperfusão intestinal da artéria ileal: a) o código químico dos neurônios entéricos imunorreativos ao óxido nítrico sintase (NOS), calbindina, calretinina, colina acetil transferase (ChAT), VIP (peptídeo vaso intestinal ativo), NPY colocalizados com marcador neuronal anti-HuC/HuD e com o receptor P2X2 e P2X7; b) a expressão do receptor P2X2 e P2X7 nos neurônios entéricos; c) o perfil e a densidade neuronal dos neurônios imunorreativos receptor P2X2-7 ao NOS, calbindina, calretinina, CHAT, ao VIP e NPY, d) o processo da apoptose e necrose dos neurônios entéricos e e) células gliais entéricas . Serão analisados o íleo de ratos (n=4 isquêmicos e n=4 controles) submetidos a isquemia por 30 minutos e com 2, 12, 24, 72 horas, 7 dias e 1 mês de reperfusão. Os tecidos serão preparados por métodos imunohistoquímicos de simples e duplas marcações do receptor P2X2 e P2X7 e do marcador neuronal (anti-Hu) com NOS, calbindina, calretinina, ChAT, VIP, NPY. As céulas gliais entéricas serão marcadas com S-100. As análises qualitativas e quantitativas das contagens das colocalizações, das densidades neuronais e perfis neuronais e células gliais serão obtidas dos microscópios da fluorescência e de Confocal de Varredura a Laser. Será feita análise da detecção protéica do receptor P2X2 e 7. Serão feitas análises estatísticas. (AU)