Papel do antagonista brilliant blue green (BBG) sobre o receptor P2X7 e o sistema nervoso entérico do íleo de ratos submetidos a isquemia e reperfusão intestinal: estudo morfofuncional

Resumo

Dor abdominal pode ser consequente a inúmeras causas, entre as várias possibilidades pode ser quadro de isquemia intestinal. No trato digestório a isquemia/reperfusão intestinal (I/R-i) acarreta alterações morfológicas nos neurônios entéricos. Este trabalho tem como objetivo analisar o efeito do antagonista Brilliant Blue Green (BBG) sobre o receptor P2X7 e o sistema nervoso entérico do íleo de ratos Wistar submetidos à I/R-i (isquemia e reperfusão). A isquemia intestinal será obtida pela obstrução do fluxo sanguíneo das artérias ileais pelo tempo de 45 minutos, seguida por períodos de reperfusão de 4, 24 horas e 14 dias, e terá um grupo sem reperfusão. No grupo sham não haverá a oclusão das artérias ileais. O antagonista do receptor P2X7, BBG será injetado após 1 hora da isquemia no grupo de 24 h, e por 5 dias consecutivos no grupo de 14 dias. Os tecidos serão preparados por métodos imunohistoquímicos de duplas e triplas marcações do receptor P2X7 com a Óxido Nítrico Sintase (NOS), Neurofilamento (NF), Acetilcolina Transferase (ChAT), calretinina (Calr), Neuropeptídeo Y (NPY), e Peptídeo Intestinal Vasoativo (VIP) e com o pan-neuronal anti-HuC/D. Para as análises qualitativas e quantitativas serão utilizados microscópios de fluorescência e de Confocal de Varredura à Laser. Serão utilizadas outras técnicas para as análises: da expressão proteica do receptor P2X7 por meio do Western Blotting, da presença dos neutrófilos pela técnica histoquímica da mieloperoxidase (MPO), da apoptose pela Técnica do TÚNEL e da atividade funcional da motilidade intestinal, pela técnica de banho de órgãos. Após, será feita análise estatística dos dados dos grupos. (AU)