Modelo de estudo de imunomodulação em bovinos: Expressão do MHC classe 1b em células trofoblásticas e mesênquimais da placenta de conceptos clonados e naturais

Resumo

Na placentação de bovinos ocorre uma invasão trofoblástica estrita, causada pelas células gigantes trofoblásticas (CGTs) que se fusionam com epitélio uterino, terminando na degeneração das células híbridas e/ou sua reabsorção pelo trofoblasto, com isso ocorre a liberação de substâncias e DNA fetal livre (fDNA) na corrente sanguínea materna, assim como no citotrofoblasto humano. A identificação de fDNA no soro materno demonstra efetivamente a migração, que ocorre com pouca interferência das células NK, indicando imunomodulação nessas células. Esta ação é provavelmente devido a uma molécula classe Ib do MHC, possível homólogo funcional do gene PED de murinos e do HLA-G de humanos que sabidamente tem efeito no melhor desenvolvimento do embrião e na proteção à ação das células NK maternas. Essa imunomodulação das CGTs poderia ser extrapolada para as células mesênquimais que inibem a função linfocítica mediante supressão das células T CD4+ e CD8+ e são importantes nos estudos de terapia celular. Portanto o objetivo desse trabalho é de caracterizar o homólogo do PED/HLAG, nas CGTs e células mesênquimais amnióticas bovinas. Para tanto serão utilizadas gestações de conceptos bovinos clonados que expressam a proteína verde fluorescente (GFP) e de gestações controle (obtidas em frigorífico) com 60 e 90 dias de gestação. Serão coletados placentônios, âmnio e soro materno. Parte das amostras (placentônios) será rotineiramente fixada e incluída em parafina para realização técnica de imunohistoquímica - para GFP e homólogo PED/HLAG - parte será congelada em nitrogênio líquido (placentônios, âmnio e soro materno) para extração de mRNA e verificação da expressão do homólogo PED/HLAG; o âmnio será utilizado para cultivo de células mesênquimais para imunocitoquímica e o soro materno para identificação de fDNA por PCR. Os resultados obtidos serão comparados entre gestações bovinas de conceptos clonados e de monta natural para caracterização da imunomodulação nas CGTs e células mesênquimais amnióticas. A identificação do homólogo PED/HLAG nas CGTs e nas células mesênquimais amnióticas bovinas é de grande interesse para os estudos em placentação bovina e de terapia com células mesênquimais.