Análise da expressão das proteínas RAB anterior à agregação proteica associada à neurodegeneração

Resumo

Inclusões protéicas contendo Tau hiperfosforilada, alfa-sinucleína e beta amilóide são encontradas distribuídas por todo o encéfalo durante o processo de envelhecimento e podem estar relacionadas à neurodegeneração. Sabe-se que alterações do tráfego intracelular podem preceder a formação desses agregados em modelos experimentais de desordens neurodegenerativas o que seria o primeiro fator importante para a degeneração celular. Esta deficiência do transporte também se reflete na disfunção da comunicação intercelular nos primeiros estágios da neurodegeneração indicando prejuízo da efetividade da sinapse antes da formação dos agregados. O distúrbio do tráfego intracelular em doenças neurodegenerativas pode estar relacionado às proteínas Rab, que pertencem à família de pequenas GTPases, com funções de tráfego de vesículas e organelas. Sabendo que a disfunção no sistema de transporte de vesículas do complexo de Golgi para o retículo endoplasmático, e na endocitose, durante a formação de agregados de proteína beta-amiloide, Tau e alfa-sinucleína, são características marcantes das doenças de Alzheimer, Parkinson e outras, a proposta do presente estudo é avaliar os eventos associados ao tráfego intracelular, com ênfase nas proteínas Rab 1, 4, 5, 6, 11 e 32, que sejam importantes para a formação dos agregados proteicos característicos de doenças neurodegenerativas. Para isso utilizar-se-á o modelo de tratamento com rotenona que induz formação de agregados para análise do momento de formação das inclusões proteicas e do comportamento das proteínas Rab em culturas de células do o hipocampo, substância negra e locus coeruleus. Para este estudo serão utilizadas técnicas de Western Blotting e PCR em tempo real. (AU)