Caracterização de isoformas do gene antimicrobiano Spag11 e suas proteínas de interação no desenvolvimento do rato: regulação da expressão e potenciais papéis fisiológicos do gene Spag11

Resumo

Vários genes que codificam diferentes proteínas antimicrobianas, incluindo o gene SPAG11(sperm associated antigen 11), têm sido descritos no epidídimo e outros tecidos do trato reprodutor masculino. A estrutura gênica, expressão e função do gene SPAG11, cujos produtos protéicos são secretados de forma abundante por células epiteliais do epidídimo e de outros tecidos do trato reprodutor masculino, vem sendo estudada pelo nosso grupo em diferentes espécies. Desvendar o mecanismo de ação de isoformas do gene SPAG11 é, neste momento, um dos nossos objetivos nessa linha de pesquisa (imunidade inata e trato reprodutor masculino). No presente projeto, propomos caracterizar a expressão do gene Spag11 (Spag11c e Spag11e; RNAm e proteína) no período pré- e pós-natal de ratos Wistar. Correlacionaremos esse padrão de expressão com o do receptor de andrógeno (Ar) e das proteínas triptase alfa/beta 1 (Tpsab1), tetraspanina 7 (Tspan7) e atractina (Atrn), recentemente identificadas como potenciais proteínas de interação da SPAG11D humana (proteína inteira ou região C-terminal, esta também presente na SPAG11E humana e de rato). A interação in vitro da SPAG11C (humana e rato) com essas proteínas de interação será confirmada. Elementos consenso regulatórios na região promotora do gene Spag11 de diferentes espécies serão identificados e analisados. Estão previstos ensaios de RT-PCR em tempo real, de hibridização in situ, imuno-histoquímica, bioinformática e proteômica de interação proteínaproteína. Identificar fatores que regulam a expressão do gene Spag11 e o mecanismo de ação de seus produtos contribui para o conhecimento sobre eventos inflamatórios e/ou infecciosos no trato reprodutor masculino, desenho de estratégias e ferramentas farmacológicas para a prevenção/tratamento de doenças sexualmente transmissíveis e identificação de novos alvos terapêuticos para o controle da fertilidade masculina.