Tratamento in vivo e in vitro com a associação de N-acetilcisteína e deferoxamina em camundongos distróficos

Resumo

Devido ao fato dos camundongos mdx, modelo experimental da distrofia muscular de Duchenne, apresentarem peroxidação lipídica da membrana causada pelo aumento da produção espécies reativas de oxigênio (EROs) no período que antecede o início da degeneração das fibras musculares, sugere-se que o estresse oxidativo pode ser um dos mecanismos primários da degeneração muscular distrófica, ao invés de ser um efeito secundário deste processo. Camundongos mdx tratados com o antioxidante N-acetilcisteína (NAC) apresentaram diminuição da degeneração muscular. De acordo com a literatura a associação de NAC com Deferoxamina (DFX) produz resultado mais efetivo contra o estresse oxidativo do que a administração de NAC isoladamente. Desta forma, o objetivo do presente estudo é verificar, através de análises morfológica, celular e bioquímica, se o tratamento in vivo e in vitro com a associação de NAC e DFX diminui a produção das EROs. Sugerimos que esta diminuição interfira na liberação de moléculas inflamatórias (como por exemplo o TNF-±), na concentração de cálcio nos músculos distróficos e consequentemente promova a diminuição da degeneração muscular nos camundongos mdx. Para os estudos in vivo serão utilizados camundongos C57BL/10 (grupo controle) e camundongos mdx, com 14 dias de vida pós-natal. Os camundongos mdx e C57BL/10 serão divididos em 4 grupos experimentais: tratados com salina, tratados com NAC+DFX, tratados com DFX e tratados com NAC. Todos os animais serão submetidos à análise de medida de força. Os músculos Esternomastóideo (STN), Diafragma (DIA) e Tibial Anterior (TA) serão retirados e submetidos às técnicas histológicas (HE e azul de Evans), Western Blotting (TNF-±, NF-kB e 4-HNE) e TBARS. Amostras de sangue serão utilizadas para determinação de creatina quinase (CK). Nos experimentos in vitro serão utilizados os músculos do membro pélvico de camundongos C57BL/10 e mdx com 14 dias de vida. As culturas de células musculares serão utilizadas para análise de cálcio, Western Blotting e TBARS após serem tratadas ou não com NAC e DFX. (AU)