Fatores de adesão e biofilmes gerados por micro-organismos isolados de canais radiculares

Resumo

Sabe-se que a microbiota endodôntica é preferencialmente anaeróbia, devido às condições deste nicho e dos nutrientes disponíveis, sendo estes micro-organismos na sua maioria proteolíticos. Fatores de adesão propiciam sua instalação nas paredes do canal radicular, constituindo biofilmes, assim como proliferação dentro dos túbulos dentinários. Os micro-organismos constituintes de biofilmes trocam material genético, aumentando a resistência dos mesmos e é quase impossível um isolado clínico ter os genes totalmente iguais à cepa padrão de coleções de cultura como da ATCC (American Type Culture Colection). O presente estudo objetiva investigar três espécies de micro-organismos, comuns de canais radiculares com polpas necróticas, comparando cinco isolados clínicos com a respectiva cepa ATCC, e ainda avaliar algumas características das mesmas em formas planctônicas ou em biofilme. As espécies anaeróbias investigadas serão Fusobacterium nucleatum e Bifidobacterium dentium, além do facultativo Enterococcus faecalis. Os isolados clínicos serão adquiridos por meio de cultura, isolamento e identificação por série bioquímica com testes comerciais (Sistema Api, Bio-Meriéux, França). Serão constituídos biofilmes na forma estática em membrana de celulose. Os mesmos serão caracterizados por microscopia eletrônica e mensurados quanto ao volume por microscopia confocal e unidades formadoras de colônias (UFC) por cultura. De acordo com a literatura, cada espécie possui um gene de adesão específico, que confere essa vantagem à bactéria. Estes genes específicos serão avaliados quanto à sua expressão através da técnica do Real-time PCR, ou seja, a maior ou menor produção do fator de adesão, estando as bactérias produtoras na forma planctônica ou de biofilme, de ATCC ou isolado clínico. O conhecimento mais apurado do comportamento dos micro-organismos dos canais radiculares propiciará melhores modelos de estudo antimicrobianos para uso futuro, além do maior conhecimento da sua virulência. (AU)