Estresse oxidativo na leishmaniose visceral canina

Resumo

Embora muitos estudos já tenham sido conduzidos avaliando a função neutrofílica no estabelecimento da leishmaniose visceral, escassos são aqueles realizados com a doença já estabelecida em seus diferentes estágios. É possível que alguns sinais clínicos como a anemia hemolítica que ocorre na doença em cães possa estar relacionado com o estresse oxidativo resultante da peroxidação lipídica. O estresse oxidativo ocorre devido a um desbalanço entre a produção de radicais livres, que podem ser provenientes de neutrófilos ativados, e as defesas antioxidantes do organismo. Essas espécies reativas de oxigênio lesionam estruturas celulares fundamentais e causam peroxidação lipídica, que, nas hemácias, pode causar anemia hemolítica. Levando em consideração a escassez de pesquisas avaliando o metabolismo oxidativo e a ausência de trabalhos avaliando a apoptose neutrofílica na leishmaniose visceral canina e, ainda, ausência de pesquisas correlacionando a disfunção neutrofílica com o estresse oxidativo, o presente trabalho tem por objetivo avaliar o estresse oxidativo em cães em diferentes estágios da leishmaniose visceral. Para tal, comparativamente será investigado o metabolismo oxidativo e apoptose de neutrófilos, o status antioxidante total e a peroxidação lipídica de cães saudáveis e cães com leishmaniose visceral em diferentes estágios da doença conforme proposto pelo LeishVet Consensus. O metabolismo oxidativo será avaliado por citometria de fluxo capilar utilizando a sonda hidroetidina e pelo método de redução do tetrazólio nitroazul (NBT). A apoptose será quantificada em citômetro de fluxo capilar utilizando sistema Anexina V-PE e por morfometria. O status antioxidante será determinado em espectrofotômetro pelo método do ABTS e a peroxidação lipídica será determinada pela quantificação do malondialdeído em leitor de placa de ELISA, ambos utilizando reativos comerciais.