Papel da enzima delta 1-pirrolina-5-carboxilato desidrogenasse (TbP5CDH) em Trypanosoma brucei: ensaios in vitro e in vivo na interação com o hospedeiro invertebrado

Resumo

Baseados nos resultados obtidos durante o estudo da P5CDH em Trypanosoma cruzi e em relatos da literatura que dão suporte à participação de L-prolina em processos fisiológicos tanto no inseto vetor Glossina morsitans (mosca tsé-tsé), quanto no parasita T. brucei, a presente proposta pretende elucidar o fenótipo de parasitas silenciados para o gene Tbp5cdh (mediante RNAi) em relação com a capacidade desses parasitas de estabelecer a infecção no modelo estabelecido em G. morsitans (in vivo). Esse modelo de infecção foi padronizado na Liverpool School for Tropical Medicine e está sendo mantido e utilizado pelo Professor Álvaro Acosta-Serrano, participante desta proposta. Paralelamente, inclui-se a análise de possíveis interações entre a TbP5CDH e outras proteínas mediante técnicas do tipo TAP-tag. Para atingir os objetivos propostos no estudo da TbP5CDH na relação entre o T. brucei e o seu hospedeiro invertebrado, serão aplicadas algumas das ferramentas geradas durante o meu trabalho de doutorado (substrato, anticorpos, inibidor enzimático, oligonucleótideos etc.). Esses dados constituirão as primeiras evidências bioquímicas e funcionais sobre o metabolismo de P5C nessa espécie. Os dados a serem obtidos, serão de relevância para a compreensão da lógica do metabolismo de diferentes tripanossomatídeos de relevância sanitária, e serão incluídos na atual tese. (AU)