Geração de proteínas recombinantes quiméricas para uso em vacinação experimental contra o Plasmodium vivax

Resumo

O Plasmodium vivax a espécie com maior distribuição geográfica no mundo e a mais prevalente nas Américas. O desenvolvimento de uma vacina contra o P. vivax é considerado prioridade para a erradicação da malária no mundo. Ao contrário do Plasmodium falciparum, atualmente não há nenhuma vacina contra o P. vivax em fase de testes clínicos avançados sendo feito no homem. É nossa hipótese que uma formulação vacinal eficaz para a indução de resposta imune protetora contra o P. vivax deverá conter regiões imunodominantes de dois ou mais antígenos do parasita. Portanto, o nosso objetivo neste projeto é gerar duas proteínas recombinantes quiméricas baseadas em domínios selecionados das proteínas Antígeno 1 de Membrana Apical (AMA-1) e região C-terminal da Proteína 1 da Superfície do Merozoíta (MSP-1), os quais foram caracterizados previamente pelo nosso grupo como altamente imunogênicos em infecções naturais e em camundongos imunizados. Ambas as proteínas serão expressas na levedura Pichia pastoris a partir de genes sintéticos com códons optimizados. Em seguida, estabeleceremos as condições de purificação das mesmas. Caso tenhamos êxito na obtenção das proteínas quiméricas, estas serão utilizadas para imunizações pré-clínicas em camundongos. A análise da resposta imune induzida em camundongos será realizada pela detecção de anticorpos IgG por ELISA. Isso nos permitirá testar a hipótese se, de fato, o uso de dois antígenos fusionados pode ser vantajoso para potencializar a resposta de anticorpos.(AU)