Estudo molecular do epigenoma na regulação da expressão de genes de receptores olfativos em mamíferos

Resumo

Células quimiossensoriais localizadas na cavidade nasal de mamíferos realizam a detecção dos estímulos olfativos. Nestas células, proteínas pertencentes a diferentes famílias de GPCRs ('G-protein-coupled-receptors') são expressas de modo muito particular: cada célula sensorial expressa apenas um dentre os milhares de possíveis receptores de sua família. Este fenômeno, conhecido como "singularidade da expressão dos genes de receptores olfativos", está na base da lógica do funcionamento do sistema olfativo em mamíferos. No entanto, os mecanismos moleculares que coordenam tal processo são ainda desconhecidos, mas tem sido levantada a hipótese de que mudanças nos padrões de metilação no DNA podem estar envolvidas. Neste projeto, esta hipótese será objetivamente testada através da avaliação do perfil epigenômico de metilação no DNA em neurônios olfativos expressando diferentes receptores ou neurônios em diferentes estágios de diferenciação. Utilizaremos para tanto uma estratégia não-enviesada ('unbiased') que resultará na descrição global das alterações epigenéticas presentes em células que escolheram expressar diferentes receptores olfativos. Regiões do genoma identificadas através desta estratégia de larga-escala serão posteriormente validadas através do método 'sequenciamento bissulfito' e suas funções serão avaliadas através de experimentos de perda- e ganho de-função. Este estudo lançará as bases para uma melhor compreensão do papel exercido por modificações epigenéticas no desenvolvimento do epitélio olfativo e na escolha de genes de receptores durante este processo. (AU)