Implantação e otimização de métodos para autenticação de linhagens celulares

Resumo

As linhagens celulares de mamíferos são utilizadas nas mais diversas áreas da pesquisa científica tornando fundamental a obtenção das mesmas de uma fonte confiável e segura; também é importante a autenticação dessas linhagens, isto é, uma certificação de identidade da espécie de origem e uma isenção de contaminação cruzada. Tanto a identificação errônea como a contaminação das linhagens pode comprometer os resultados oriundos da utilização delas e dessa forma um monitoramento contínuo para controle de qualidade das linhagens celulares deve ser feito regularmente pelos laboratórios de pesquisa e de produção para geração de dados confiáveis. Vários métodos são utilizados para verificação da espécie das linhagens celulares como cariotipagem e análises imunológica, isoenzimática e molecular. A análise eletroforética das isoenzimas é o método padrão utilizado pelos principais centros certificadores internacionais inclusive útil também para detecção de contaminação cruzada inter-espécies. Técnicas moleculares direcionadas para o DNA mitocondrial também podem ser utilizadas para esta identificação de espécies tanto de linhagens celulares animais como humanas; já as técnicas baseadas nas regiões micro-satélites do DNA foram desenvolvidas apenas para as linhagens humanas (contaminação intra-espécies). O objetivo do projeto é a implantação de uma técnica molecular para verificação de espécie das linhagens celulares animais além da otimização da técnica de eletroforese de isoenzimas. (AU)