RNA-Seq de leucócitos de sangue periférico de bovinos: análise funcional do transcriptoma obtido frente à imunização com antígenos recombinantes do carrapato Rhipicephalus microplus e à infestação e validação dos resultados com arranjos de PCR

Resumo

As infestações por Rhipicephalus microplus, o carrapato do boi, causam enormes prejuízos à pecuária. Carrapatos induzem resposta imune em seus hospedeiros, portanto o controle imunobiológico é possível. Devido à baixa eficácia de vacinas anti-carrapato comerciais têm se buscado novos antígenos protetores e os mecanismos imunes que protegem contra fortes infestações. O grupo de pesquisa em carrapatos da FMRP-USP tria antígenos candidatos selecionados por meio de análise comparativa do transcriptoma de carrapatos alimentados em hospedeiro resistente ou suscetível, sendo que quatro antígenos salivares recombinantes já foram testados como vacina anti-carrapato multicomponente para bovinos. A vacina induziu produção de anticorpos e reduziu significativamente parâmetros parasitológicos da infestação (eficácia de 73,2%). Uma visão global dos processos moleculares envolvidos durante a imunização e a infestação dos bovinos vacinados e do grupo controle (que recebeu apenas adjuvante/salina) gerará informações importantes para o entendimento dos mecanismos imunes envolvidos na interface carrapato/hospedeiro e na resposta à vacina. Desse modo, esta proposta tem por objetivo analisar o transcriptoma de leucócitos do sangue periférico desses animais. O transcriptoma foi obtido por RNA-seq e os dados gerados serão analisados por ferramentas de bioinformática (Data Ranger e Metacore) para identificação dos genes diferencialmente expressos e dos processos biológicos associados tanto à imunidade protetora conferida pela vacina e quanto à infestação em si. Resultados relativos aos processos biológicos associados a infestações serão validados em populações distintas de bovinos por meio de arranjos de PCR. (AU)