Cultura Heterotípica: interação células epiteliais, estroma mamário, macrófagos e plaquetas no câncer de mama: liberação de enzimas proteolíticas, sinalização dos receptores toll-like e sua correlação com o prognóstico

Resumo

O câncer de mama é uma doença multifatorial heterotípica a qual por muito tempo pesquisadores tentaram extrair da sua complexidade modelos experimentais puristas e mais objetivos, o cultivo de células epiteliais. Este sistema permitiu o avanço da genética e biologia molecular do câncer. Entretanto, o cultivo único de células epiteliais imortalizadas mamárias é insuficiente para mimetizar o microambiente tumoral. Devemos ressaltar que as linhagens imortalizadas de células tumorais, se desenvolveram sem interações heterotípicas, e desviam do comportamento de células de tumores humanos. Há evidências de que, em carcinomas de mama, 90% das células presentes na massa tumoral não são neoplásicas [1]. Neste sentido, a cultura heterotípica formada basicamente por células epiteliais, estroma mamário, macrófagos e plaquetas apresentam uma melhor alternativa para investigação dos sinais bioquímicos associados às enzimas proteolíticas, fatores tróficos e os agonistas dos receptores toll-like. O presente projeto tem como objetivos: 1) a caracterização das células e imuno-histoquímica de tecidos extraídos de biópsias de pacientes com e sem câncer de mama. 2) Identificar as enzimas proteolíticas que estão sendo secretadas com a interação dessas células através de biblioteca de substratos FRETs e inibidores família específicos. 3) Após a identificação das enzimas e substratos, procederemos com a avaliação da ativação das plaquetas por essas enzimas. 4) Finalmente, temos como alvo a ativação de receptores toll-like em células epiteliais e em plaquetas, pelo meio de cultivo da cultura heterotípica entre fibroblastos e adipócitos. Com base nessas informações, esse projeto nos permitirá novas abordagens terapêuticas tendo como alvo as células epiteliais mamárias de diferentes estadios mimetizadas com a estrutura estromal, macrófagos e plaquetas.