Efeito da expressão da proteína de transferência de colesteril éster (CETP) sobre a função endotelial: estudos em camundongos transgênicos e in vitro

Resumo

A CETP é uma proteína que promove remodelamento de lipoproteínas plasmáticas e modula o risco de aterosclerose. Recentemente propusemos que a CETP desempenha novas funções biológicas, tais como anti-oxidante, anti-inflamatória e anti-adipogênica. Neste projeto, levantamos a hipótese de que a CETP tem ainda uma função adicional, isto é, altera a biodisponibilidade de óxido nítrico e conseqüentemente a função endotelial e o processo da aterogênese. A CETP poderia exercer esta ação de duas maneiras. No primeiro caso, a CETP traria benefício para função endotelial, já que a CETP reduz a quantidade de colesterol livre no plasma e provavelmente na membrana das células endoteliais. A redução de colesterol na membrana celular diminui a estabilidade da interação entre eNOS e a proteína cav-1 na cavéola, o que aumenta a produção de NO. No segundo caso, considerando que a HDL diminui a interação eNOS-cav-1, a CETP traria prejuízo para a função endotelial, já que esta proteína diminui a concentração de HDL no plasma. Evidências da literatura favorecem a primeira possibilidade, uma vez o tratamento de ratos hipertensos com o inibidor da CETP, torcetrapib, resultou em prejuízo da função endotelial. Assim, os objetivos do projeto são estudar o efeito da expressão da CETP na função endotelial e reatividade vascular. Uma vez estabelecido o efeito, investigaremos os possíveis mecanismos modulados pela CETP (teor de colesterol na membrana, expressão, localização e atividade da eNOS, biodisponibilidade do NO, modificação do estado redox e/ou inflamatório, bem como as vias de sinalização envolvidas). Para tanto, realizaremos estudos in vivo com camundongos transgênicos que expressam a CETP humana comparados aos irmãos não-transgênicos (ntg) que não expressam esta proteína. Os animais serão estudados em seu estado basal e após dieta rica em gordura e colesterol. Tal tratamento induz inflamação e estresse oxidativo nos vasos dos animais. Nós propusemos que a CETP tem função anti-oxidante e anti-inflamatória, e por isso pensamos que os animais CETP podem responder melhor a estes tratamentos. Adicionalmente, estudaremos linhagem de células endoteliais humanas com a expressão da CETP modulada por RNAi.