Avaliação funcional da arginina metiltransferase LmjPRMT6 de Leishmania major

Resumo

Por sua importância na saúde mundial, parasitos do gênero Leishmania têm sido amplamente estudados. A regulação da expressão gênica nesses parasitos ocorre principalmente em nível pós-transcricional. Nesse contexto, sabe-se que proteínas ligantes de RNA são importantes protagonistas nessa regulação. Estudos recentes demonstram que Arginina N-metiltransferases (PRMTs) desempenham importantes papéis em leveduras e, que boa parte de seus alvos são proteínas ligantes de RNA. Dada a importância das proteínas ligantes de RNA na regulação gênica pós-transcricional, proteínas que as modifiquem (no caso, PRMTs) e influenciem sua interação com RNA, tornam-se importantes objetos de estudo em Leishmania spp. Assim sendo, nossa proposta inclui: (i) desenvolver ferramentas moleculares que possibilitem estudar funções da PRMT6, (ii) avaliar a função e localização subcelular de PRMT6 de Leishmania major, (iii) identificar mudanças fenotípicas relacionadas ao crescimento e à virulência (in vivo e in vitro) tanto para mutantes superexpressores quanto nocautes para PRMT6 e (iv) descobrir alvos de PRMT6, abrindo portas para pesquisas futuras e para um melhor entendimento de como a PRMT6 pode regular a expressão gênica. Serão gerados diversos transfectantes e ensaios bioquímicos serão utilizados para avaliar a atividade de metiltransferase de PRMT6. Ensaios de imunoprecipitação serão utilizados para comprovar a associação de PRMT6 com outras proteínas. Os resultados devem permitir a identificação de alvos de PRMT6 e de mecanismos de regulação de expressão gênica no parasito.