Aplicações modernas da espectroscopia de fluorescência resolvida no tempo para investigar a ligação dos peptídios da DGAT1 em substratos lipídicos

Resumo

A enzima diacilglicerol aciltransferase 1 (DGAT1) é uma proteína microssomal responsável pela etapa final na síntese de triacilgliceróis. Pouco ainda se sabe acerca da sua estrutura tridimensional devido à seu alto caracter hidrofóbico e seu estado ligado a membrana. Análises de bioinformática indicam que a função enzimática de DGAT1 encontra-se num grande "loop" luminal onde se encontram dois peptídios que são preditos como os sítios de ligação para os dois tipos de substratos da enzima. O presente projetoa tem como objetivo investigar a ligação destes peptídios em Acil-CoAs e diacilgliceróis (que são os substratos da reação enzimática), usando avanços modernos em da espectroscopia de fluorescência resolvida no tempo. Estes estudos serão realizados em colaboração com o Prof. David Jameson, do Departamento de Biologia Celular e Molecular da Universidade do Havaí em Manoa, com o intuito de determinar a especificidade e afinidade de cada sítio de ligação da enzima para os substratos recrutados na síntese de triacilglicerois. (AU)