Análise de modificações pós-traducionais de toxinas nativas e recombinantes da peçonha Tityus serrulatus por espectrometria de massas

Resumo

A peçonha de Tityus serrulatus é constituída por uma mistura complexa de enzimas, nucleotídeos, aminas biogênicas, muco insolúvel, oligopeptídeos, moléculas de baixa massa molas, inibidores de proteases, liberadores de histamina, aminoácidos e outros componentes orgânicos, particularmente, peptídeos com atividade neurotóxica. Vário componente tóxicos tem sido isolados e caracterizados, entretanto, apesar do seu potencial biotecnológico, sabe-se que existem vários componentes da peçonha que ainda não foram identificados, principalmente devido às dificuldades na sua obtenção. O desenvolvimento de técnicas de produção de biomoléculas em larga escala, como sistema de expressão heterólogo, é de grande importância uma vez que permite a obtenção de novos agentes terapêuticos. O monitoramento de modificações pós-transducionais é de extrema importância no processo de expressão heteróloga, uma vez que essas modificações podem interferir nas características físico-químicas, estruturais e farmacológicas das proteínas recombinantes. Durante as últimas duas décadas, a espectrometria de massas vem se tornando uma ferramenta analítica para o controle da qualidade da produção dessas proteínas e permite a determinação quantitativa e qualitativa de alta precisão de alterações moleculares e características estruturais. Portanto, este projeto tem como objetivo aplicar técnicas de espectrometria de massa na avaliação das modificações pós-traducionais em toxinas nativas e recombinantes de T. serrulatus, a fim de validar a sua expressão heteróloga visando suas potenciais aplicações biotecnológicas. (AU)