Estudo proteômico comparativo das peçonhas branca e amarela de Crotalus durissus terrificus, com ênfase nas enzimas hialuronidase e L-aminoácido oxidase

Resumo

Diversos estudos mostram que as peçonhas de Crotalus durissus terrificus (Cdt) variam significativamente em termos de coloração, quantidade de proteína e atividade biológica, mesmo entre serpentes da mesma região. Essa variabilidade e complexidade das peçonhas pode ser decorrente de variações ontogenéticas e geográficas e tem diversas implicações na terapêutica dos acidentes por serpentes. Isso dificulta a seleção de soros antiofídicos e espécimes para a produção destes, bem como a compreensão da natureza dos componentes da peçonha e dos efeitos patológicos locais e sistêmicos decorrentes do envenenamento. A enzima CdtHya1 é a primeira hialuronidase de peçonhas crotálicas recentemente isolada pelo nosso grupo de pesquisa. Esta enzima apresenta alta atividade antiedematogênica, aumenta a difusão de crotoxina e fosfolipase A2 e potencializa a ação da crotoxina. Apesar da relevância da hialuronidase no envenenamento crotálico, a enzima é pouco expressa nas peçonhas, o que tem dificultado sua detecção em estudos proteômicos e transcriptômicos de serpentes do gênero Crotalus. Este projeto visa analisar a complexidade e extensão de modificações pós-traducionais da hialuronidase das peçonhas branca e amarela de Cdt através de abordagens proteômicas. Este projeto será pioneiro na realização da análise proteômica comparativa das peçonhas branca e amarela de Cdt após fracionamento por cromatografia de troca iônica, na tentativa de identificar proteínas minoritárias inéditas nos bancos de dados, contribuindo para a compreensão da heterogeneidade das peçonhas e para o desenvolvimento de antivenenos mais eficientes. Adicionalmente, pretende-se realizar a análise proteômica comparativa da enzima L-aminoácido oxidase (LAAO) nas peçonhas branca e amarela, visto que a cor da peçonha geralmente está relacionada à presença da LAAO. Estas enzimas estão presentes em pequenas quantidades na peçonha, o que restringe seus estudos. No entanto, o aumento da sensibilidade das técnicas proteômicas, especialmente a espectrometria de massas, possibilita o estudo rápido e eficiente de quantidades mínimas de amostra e torna este projeto viável. (AU)