Caracterização genotípica de Toxoplasma gondii em amostras de gestantes da região noroeste do estado de São Paulo

Resumo

A toxoplasmose é uma doença resultante da infecção pelo parasita Toxoplasma gondii que atinge grande parte da população mundial. Clinicamente se manifesta nas formas cerebral, congênita e ocular. A prevalência desta doença varia nas diferentes áreas ao redor do mundo e depende de fatores climáticos, hábitos alimentares, higiene e idade dos indivíduos afetados. Nos últimos anos nosso grupo revelou que os índices de infecção por T. gondii em gestantes da região noroeste do Estado de São Paulo são de aproximadamente 65,0%, que o índice de infecção congênita em São José do Rio Preto, SP é de 2,3%. A caracterização gênica do T. gondii realizada em amostras humanas revelou uma grande diversidade e, assim, tenta-se esclarecer a relação entre as diferentes cepas e a infecção humana, inclusive de nossa região. O objetivo geral deste estudo é caracterizar a infecção por T. gondii a partir de amostras biológicas humanas de gestantes e recém-nascidos. Os objetivos específicos compreendem caracterizar genotipicamente as cepas de T. gondii da região com o uso do método de PCR-RFLP e estabelecer relação com o quadro clínico dos pacientes acometidos. Serão selecionadas amostras de soro e DNA genômico de pacientes com suspeita ou diagnóstico clínico de toxoplasmose gestacional e congênita, estocadas no Laboratório de Imunogenética do Departamento de Biologia Molecular da FAMERP, cujos dados epidemiológicos dos respectivos pacientes foram coletados. Os métodos comerciais ELISA (DiaSorin) e ELFA (Biomerieux) serão utilizados para a identificação de anticorpos IgA, IgM e IgG anti-T. gondii. A identificação do DNA genômico do T. gondii será realizada com o uso dos métodos PCR convencional, PCR nested, PCR Tempo Real e PCR-RFLP. Os resultados das análises sorológicas e moleculares serão comparados. Os testes estatísticos Ç2 (com correção de Yates), o teste exato de Fisher e o test t (quando for o caso) serão utilizados nas comparações. Também será calculado o Odds Ratio e o intervalo de confiança a 95%, quando necessários. Os resultados deste projeto poderão contribuir para o conhecimento da epidemiologia molecular dessas formas tão importantes da toxoplasmose que é a gestacional e congênita, associando-as à gravidade da doença. Além disso, poderão colaborar para a compreensão da infecção congênita e manifestação da toxoplasmose nos fetos e recém-nascidos.